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非小细胞肺癌microRNA-21检测技术的研究

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毕业论文范文题目：非小细胞肺癌microRNA-21检测技术的研究，论文范文关键词：非小细胞肺癌microRNA-21检测技术的研究
非小细胞肺癌microRNA-21检测技术的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：如今临床应用的肿瘤标记物一方面促进了肿瘤诊断技术的发展,另一方面又由于具有较大的创伤性和不稳定性,其临床应用受到限制。越来越多的报道提出microRNA生物标记物在癌症治疗方面有着十分重要的潜在价值。其中血液microRNA作为肿瘤诊断和预后分子标记物,具有创伤小、稳定、便捷的优势。然而传统的microRNA检测技术大都需要较多的步骤,由此带来的操作误差会影响检测的结果,需要发展新的检测技术以简化操作过程,避免操作误差,提高检测准确度。电化学交流阻抗技术具有检测特异性好、灵敏度高、操作简便等特点,可以与其它检测技术相结合,提高microRNA检测的水平。本论文主要开展（略..）了如下几个方面的工作:(1)采用实时荧光定量PCR技术检测肺癌患者与正常人群血液中miR-21的浓度水平,并比较二者的表达差异,根据临床病理特征对miR-21的表达量进行统计分析,评估miR-21对肺癌的诊断价值。(2)基于电化学刻蚀技术制备了传感器用微电极,并优化了微电极制备过程中的反应条件。用扫描电镜及循环伏安法对制备的微电极进行表征,分析了微电极的稳定性和可逆性。(3)首先利用巯基自组装技术构建阻抗型电化学生物传感器。通过Au-S的强静电吸附作用,将巯基标记的核酸探针自组装到镀金的微电极表面,形成RISC-miRNA复合物识别层,并用十二硫醇对传感器表面非探针空位点进行封闭处理,抑制非特异性（略..）吸附。其次,利用该传感器检测肺癌患者血液中RISC-miR-21复合物,测量探针与复合物结合前后传感器表面电子传递电阻R_(et)的增量,从而对microRNA复合物实现定量检测。最后,对生物传感器的检测条件进行了优化,使检测效果达到最佳。主要得到以下结论:(1)通过实时荧光定量PCR检测肺癌患者与正常人群血液中miR-21的表达水平,得到肺癌患者血液中的miR-21含量明显高于正常人群(P0.01)。20例肺癌患者的样本中,85%(17/20)的样本中miR-21的表达是上调的。统计结果表明miR-21的异常表达与样本的各项临床特征无关(P0.05)。受试者工作特征曲线(ROC)分析结果显示曲线下的面积大小(AUC)约为0.912±0.045,表现为78.80%的敏感性（略..）和100%的特异性,说明miR-21作为潜在分子标记有较好的实验诊断效能。血液miR-21可能成为预测肺癌的生物标记物之一。(2)应用电化学刻蚀法成功制备了合金微电极,用扫描电镜(SEM)表征微电极的表面形貌并估计了有效半径;用电化学工作站对微电极进行循环伏安分析。表征结果表明:0.1mol/L的KCl溶液,5V电压条件下所制备的微电极的性能最佳,有效半径在5μm以下;循环伏安响应曲线表明所制备的电极的导电性能良好;微电极具有很好的可逆性和稳定性。(3)利用巯基自组装技术成功构建了电化学阻抗生物传感器。利用该传感器检测RISC-miR-21复合物,交流阻抗测试结果显示巯基探针可以很好的自组装到电极表面,使[Fe（本文此处忽略..）(CN)_6]~(3-/4-)平衡电对向电极表面的扩散存在阻碍。电极表面用十二硫醇进行封闭处理后,电子传递电阻R_(et)会增加。探针与RISC-miR-21复合物的结合又进一步阻碍了[Fe(CN)6]3-/4-平衡电对的活动,电子传递电阻R_(et)继续增加。通过对电化学阻抗生物传感器检测条件的优化,得知探针与RISC-miR-21复合物在36℃培育30min后再进行检测效果最佳。

以上为本篇毕业论文范文非小细胞肺癌microRNA-21检测技术的研究的介绍部分。

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