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罗格列酮对肝癌SMMC-7721细胞株生长及对PTEN、survivin基因表达

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毕业论文范文题目:罗格列酮对肝癌SMMC-7721细胞株生长及对PTEN、survivin基因表达,论文范文关键词:罗格列酮对肝癌SMMC-7721细胞株生长及对PTEN、survivin基因表达
罗格列酮对肝癌SMMC-7721细胞株生长及对PTEN、survivin基因表达毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目的:肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)是常见的恶性肿瘤之一,在我国仅次于胃癌和食管癌,居第三位,每年死于肝癌约11万人,其中男性8万,女性3万,占全世界肝癌死亡患者的45%,其发病率高,病程进展迅速,易侵袭、转移、复发及死亡率高。随着医疗技术和医学科学研究的发展,对肝癌的诊断及治疗技术已经有了很大的提高,但是关于肝细胞癌发生发展的确切机制还不清楚,目前仍然没有有效的预防措施,因此深入地研究肝细胞癌的发病机理以及探讨新的预防及治疗措施具有极其重要的临床意义。过氧化物酶体增殖物激活受体(Peroxisomeproliferator-activatedreceptors,PPARs)是甾体激素受体超家族的新成员,PPARs共有3个亚型(α、β、γ),它们在结构、功能及组织分布上均有差异。PPARs的生物学功能复杂,参与调节脂质代谢与糖代谢、脂肪细胞分化和能量平衡、炎症反应、动脉粥样硬化及肿瘤细胞的分化与凋亡等生理和病理过程。近年来的许多研究表明PPARγ在多种肿瘤细胞中均有表达,通过多种途径抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡及分化、抑制血管生成和降低肿瘤侵袭能力等。而PPARγ配体则是激(本文此处忽略..)活PPARγ基因表达的关键。PPARγ的配体包括天然型配体和合成型配体两类。前者由实验证实从前列腺素D2衍生出的一系列前列腺素代谢产物是PPARγ的天然配体,其中15-脱氧前列腺J2(15d-PGJ2)与PPARγ的结合作用最强。合成型配体主要是胰岛素增敏剂噻唑烷二酮类化合物(Thiazolidinediones,TZDs),包括罗格列酮(Rosiglitazone,Rosi)、匹格列酮(pioglitazone)、曲格列酮(troglitazone)等。这类药物能增强机体对胰岛素的敏感性并具有降低血糖的作用,临床上主要用于Ⅱ型糖尿病的治疗[4]。国外的一些实验证明PPARγ激动剂可以有效地预防肿瘤的发生,有望在肿瘤的化学预防中发挥重要作用[5]。罗格列酮是噻唑烷二酮类药物中生物利用度最高药效最强的一种药物,且其毒副作用相对较小。本试验通过研究罗格列酮对肝癌细胞SMMC-7721生长的影响及其对促癌基因survivin、抑癌基因PTEN表达的影响,探讨PPARγ抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖生长的可能作用机制。PTEN(又名MMAC1或TEP1,定位于10q23.3),表达的是一种多功能蛋白,是继抑癌基因p53后新近发现的一种公认重要的肿瘤抑制因子,(此处忽略..)其产物的相对分子质量为56kd,分布于细胞质。具有调节细胞生长、增殖、迁移、分化等多种效应。PTEN基因是迄今发现的第一个具有特异磷酸酶活性的抑癌基因,它不仅可使酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸的蛋白脱去磷酸,而且同时还能使磷脂酰肌醇通道的磷酸脂脱去磷酸。此外,其磷酸酶蛋白活性能够抑制Rax/Mek/Erk通道以及FAK(灶性粘连激酶)通道,从而对抑制肿瘤细胞浸润侵袭起重要作用的细胞与细胞外基质的相互作用产生影响。Survivin,又名生存素,定位于17q25,基因长约15kb其表达蛋白是一种新近被发现的调亡抑制蛋白,它在正常分化成熟的组织中几无表达,仅见于胸腺、睾丸和分泌期子宫内膜,而在几乎所有人类肿瘤组织表达而正常组织不表达或低表达中的过度表达,且表达具有肿瘤细胞依赖性。国内外有大量试验提示survivin的表达可以影响肝癌的生物学行为,可使其更易发生转移、门静脉浸润等,可能是预后不良的指征,具有对肝癌等恶性肿瘤进行早期诊断和预后的潜在辅助价值。方法:1MTT法测定罗格列酮对肝癌细胞株SMMC-7721生长的抑制作用:肝癌细胞株SMMC-7721进行细胞常规培养。通过MTT,来研究罗格列酮对肝癌细胞的作用。应用单因素方差分(略..)析方法分析细胞抑制率研究有无量效及时效关系。2WesternBlot法:SMMC-7721细胞常规培养,取培养48小时的细胞加入罗格列酮分0.1、1、10、100μmol/L4个浓度组,以及选取加入10μmol/L药物的细胞取24h、48h、72h三个作用时间,采用WesternBlot法进行检测,观察罗格列酮的对SMMC-7721细胞中survivin、PTEN基因表达的影响来探讨罗格列酮作用于肝癌细胞的可能机制。应用单因素方差分析统计光密度研究有无量效及时效关系。结果:1罗格列酮对SMMC-7721细胞株的研究:MTT法结果显示,在倒置显微镜下观察到罗格列酮作用48h后,较多细胞变圆呈球型、较亮,贴壁生长细胞较少,计算细胞抑制率,结果显示罗格列酮可以显著抑制SMMC-7721细胞增殖呈明显的时间及浓度依赖性(P0.05)。2采用WesternBlot法检测蛋白表达的变化:罗格列酮取0.1、1、10、100μmol/L4个浓度组,每个浓度组选取24h、48h、72h三个作用时间对已提取的蛋白进行检测。2.1SMMC-7721细胞株中survivin蛋白表达在PVDF膜上显示条带亮度及宽度无明显变化(P0.05)。2.2SMMC-7721细胞株中PTEN蛋白表达显著增强并呈显著的时间依赖性和剂量依赖性变化(P0.01)。结论:1罗格列酮有显著(略..)的抑制SMMC-7721细胞株增殖的作用,并呈药物剂量和时间依赖性(P0.05)。说明了PPARγ受体激动剂罗格列酮可通过增强肝癌细胞中抑癌基因PTEN的表达来抑制肿瘤的增殖,促进肿瘤细胞的凋亡,从而达到治疗作用。2罗格列酮可以显著上调SMMC-7721细胞PTEN的表达,并且呈显著的时间依赖性和剂量依赖性(P0.01)。说明罗格列酮可通过增强肝癌细胞中抑癌基因的表达来抑制肿瘤的增殖,促进肿瘤细胞的凋亡,从而达到治疗作用。3罗格列酮对SMMC-7721细胞survivin蛋白的表达无显著影响,也无浓度及时间依赖性(P0.05)。表明罗格列酮可能不是通过下调survivin的途径抑制SMMC-7721细胞株的增殖。PPARγ受体激动剂对survivin表达的影响应作进一步研究。


以上为本篇毕业论文范文罗格列酮对肝癌SMMC-7721细胞株生长及对PTEN、survivin基因表达的介绍部分。
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