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革兰氏阴性菌中Ⅰ类整合子的检测

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毕业论文范文题目：革兰氏阴性菌中Ⅰ类整合子的检测，论文范文关键词：革兰氏阴性菌中Ⅰ类整合子的检测
革兰氏阴性菌中Ⅰ类整合子的检测毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的:了解大连地区临床分离的革兰氏阴性细菌(其中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为超广谱β-内酰胺酶阳性菌株,铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌对临床的多种药物耐药)中Ⅰ类整合子的分布并研究其耐药机制。方法:收集临床分离的无重复革兰氏阴性杆菌163株(包括40株大肠埃希菌、45株鲍曼不动杆菌、40株肺炎克雷伯菌、38株铜绿假单胞菌)。采用K-B纸片法测定163株革兰氏阴性菌的药物敏感性,双纸片协同实验确定大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶。药敏试验证实鲍曼不动杆菌及（此处忽略..）铜绿假单胞菌是多重耐药。煮沸法提取制备DNA模板,PCR方法扩增细菌的Ⅰ类整合子保守区和可变区,将PCR产物进行纯化并进行序列分析,用限制性内切酶HinfⅠ进行酶切分析,选取酶切产物中出现频率较高的0.15KB及1KB产物进行纯化分析及DNA序列测定,将所得序列在GeneBank中搜索,确定所选取的两个片段Ⅰ类整合子可变区基因盒的种类及排列。结果:在163株无重复革兰氏阴性杆菌中,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌菌均为产ESBLs,铜绿假单胞菌和（文章此处忽略..）鲍曼不动杆菌为多重耐药菌。40株大肠埃希菌中有28株(70%)大肠埃希菌检出Ⅰ类整合子,45株鲍曼不动杆菌中有29株(64.4%)鲍曼不动杆菌检出Ⅰ类整合子,40株肺炎克雷伯菌中有18株(45%)肺炎克雷伯菌检出Ⅰ类整合子,38株铜绿假单胞菌中有21株(55.2%)铜绿假单胞菌检出Ⅰ类整合子。在96株一类整合子阳性菌株中,78株可变区扩增阳性,限制性内切酶分析显示在大肠埃希菌,鲍曼不动杆菌,肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌中均出现。150bp,1000bp,1600bp和2000bp四种片段,其中含1000和1600bp的Ⅰ类整合子最多,占77.4%。150bp的占10.14%,2000b（本文此处忽略..）p片段占12.82%。测序结果显示0.15kb片段内不含有基因盒,但是含有整合子的5’和3’保守区的结构。1kb片段,预计基因盒种类为aadA,为氨基糖苷类耐药基因,但是测序结果不成功,原因有待查明。结论:本次试验中可以看出,在临床上Ⅰ类整合子广泛的存在于大肠埃希菌,鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中,这提示在临床上Ⅰ类整合子对大肠埃希菌,鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌耐药性的传播起着很重要的作用。但是肺炎克雷伯菌与全国一些其他地区[27]相比,其阳性率明显偏（此处忽略..）低。在选择性进行可变区酶切产物的测序中,0.15kb片段内不含有基因盒,为整合子的5’和3’保守区的结构。但是在进行可变区1kb的酶切产物测序中,测序结果不成功,原因有待于进一步查明。

以上为本篇毕业论文范文革兰氏阴性菌中Ⅰ类整合子的检测的介绍部分。

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