毛豹皮樟基因组总DNA的提取及RAPD技术体系的建立

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毛豹皮樟基因组总DNA的提取及RAPD技术体系的建立

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毕业论文范文题目：毛豹皮樟基因组总DNA的提取及RAPD技术体系的建立，论文范文关键词：毛豹皮樟基因组总DNA的提取及RAPD技术体系的建立
毛豹皮樟基因组总DNA的提取及RAPD技术体系的建立毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：本试验以毛豹皮樟的叶片为材料，通过对不同的DNA提取方法进行试验，寻找最佳的毛豹皮樟DNA提取方法；优化扩增程序和反应条件，建立起毛豹皮樟的RAPD技术体系；并将该技术体系应用于80个毛豹皮樟叶片的RAPD扩增中。结果表明：一、使用改良SDS提取法有效地解决了毛豹皮樟基因组总DNA提取中的褐变问题，同时所提取的DNA均呈白色絮状，A_(260)/A_(280)值（略..）都在1.8以上，从检测所得产率和纯度可知该DNA模板完全可以用于RAPD分析；另外，该方法还具有成本低、操作简单、省时等特点。二、用CTAB法提取毛豹皮樟叶片的DNA时，所得DNA量很少，而且模板中含色素、蛋白质等杂质很多，在后期进行RAPD扩增时，杂质的影响导致扩增不稳定或者扩增失败，表明CTAB提取法对于含酚类等次生物质较多的物种并不适用（文章此处忽略..）。采用常规的SDS法所得的DNA量很少，而且模板中含色素、蛋白质等杂质很多，在后期进行RAPD扩增时，杂质的影响导致扩增不稳定或者扩增失败。三、扩增程序采用：预变性温度为94℃1min，变性温度为94℃1min，复性温度为34℃1min，72℃延伸2min，共45个循环，最后72℃延伸10min，同时反应体系(20μl反应体系)采用：dNTPs0.4μl(各含1Nm/μl)，10×PCR2μl，M（此处忽略..）gCl_2μl，Taq酶0.3μl(0.5u/μl)，H_2O11.3μl，DNA模板2μl(40ng)，Primer2μl(0.8Pm/μl)，能够得到清晰稳定的扩增带谱。四、将所建立的RAPD技术体系应用于20个毛豹皮樟叶片DNA的RAPD扩增中，筛选出16个引物，所得的谱带清晰，多态性高达46.8％，反映了各试材之间在DNA序列上存在相当大的差异，可用于毛豹皮樟的种质资源鉴定分析。五、用（文章此处忽略..）筛选出的部分随机引物对80个毛豹皮樟的DNA模板进行RAPD扩增，得到了稳定的RAPD带谱。这些特征引物对各种材料扩增所得到的特征谱带反映了基因组总DNA碱基序列的特异性，可用于聚类分析。

以上为本篇毕业论文范文毛豹皮樟基因组总DNA的提取及RAPD技术体系的建立的介绍部分。

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