BADH和CMO基因的无选择标记表达载体转化玉米的研究

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BADH和CMO基因的无选择标记表达载体转化玉米的研究

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毕业论文范文题目：BADH和CMO基因的无选择标记表达载体转化玉米的研究，论文范文关键词：BADH和CMO基因的无选择标记表达载体转化玉米的研究
BADH和CMO基因的无选择标记表达载体转化玉米的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：玉米是重要的粮食和饲料作物，也是现代食品、医药、化学工业的重要原料作物，玉米是对盐分中度敏感的作物，土壤干旱、盐碱胁迫是降低其产量的主要环境因素之一，因此，培育耐盐玉米品种具有重要的意义。采用传统的育种方法选育抗旱耐盐品种极为缓慢。随着分子生物学技术的发展，利用基因工程技术培育抗逆植物新品种已成为21世纪农业发展的一个重要方向。目前，多数植物的遗传转化都要使用选择标记基因，诸如抗生素或除草剂抗性基因等来筛选转化子，虽然仍无直接研究结果表明选择标记基因影响人类健康或环境安全（文章此处忽略..），但引起了人们对转基因产品安全性的担心。为了消除转基因作物的安全性顾虑，无选择标记转基因植物应运而生。本实验采用无选择标记的BADH和CMO基因表达载体转化玉米，为培育出具有安全、高度耐盐碱的玉米新品种打下良好基础。本文采用玉米常用白交系为受体材料，对胆碱单加氧酶基因(CMO)和甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)的无选择标记表达载体转化玉米进行了研究，鉴定了玉米愈伤组织及苗耐盐碱性敏感性，确定玉米愈伤组织及幼苗盐临界浓度，对已转化的愈伤组织及幼苗进行筛选和几项重要生理指标的鉴定。（略..）评价转BADH和CMO基因玉米耐盐碱的能力。取得的主要研究结果如下：1．进一步优化了农杆菌介导的玉米愈伤组织转化条件以普通玉米自交系H99和P_2的胚性愈伤组织为材料，利用农杆菌介导法将BADH和CMO基因导入玉米自交系中，研究农杆菌转化系统的优化。结果表明，浓度(OD值)在0.5-0.6左右，侵染25分钟时的愈伤组织的侵染效果最好，转化率达到4.0％。2．利用农杆菌介导法把BADH和CMO基因转入玉米，获得了转基因植株。将转化的愈伤组织进行分化出苗后进行PCR、Southern杂交，证明外源目的（文章此处忽略..）基因已整合到玉米基因组中。3．利用花粉管通道法把BADH和CMO基因转入玉米，获得了转基因植株。采用了花粉管通道法对玉米自交系进行遗传转化。将抗盐基因转入玉米自交系030、吉农201和父本1中，并从中得出花粉管通道法的最佳转化条件。用SSC溶解的质粒，导入间隔时间要在8-20小时范围内，并且导入质粒的浓度为500μg／mL、导入量为200μl即可达3.3％的转化率，通过转化植株后代的PCR、Southern杂交分析，证明了抗盐基因已整合到受体植株的基因组中，并在后代中得以表现。4．确定玉米愈伤组织盐筛选临界（此处忽略..）浓度为32mmol／L，幼苗盐筛选临界浓度为1.0％。5．对转BADH和CMO基因幼苗耐盐性相关生理指标进行了鉴定所测的耐盐性生理指标为细胞膜透性、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性以及过氧化物酶活性。对转化苗在浓度为1.0％的盐水浇灌条件下，定期测其生理指标，并与非转化苗的指标作对比，发现其细胞膜透性、丙二醛含量有着明显的降低，而超氧化物歧化酶活性以及过氧化物酶活性有明显的提高。

以上为本篇毕业论文范文BADH和CMO基因的无选择标记表达载体转化玉米的研究的介绍部分。

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