鸭肠炎病毒单克隆抗体的制备及野毒株的分离鉴定

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鸭肠炎病毒单克隆抗体的制备及野毒株的分离鉴定

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毕业论文范文题目：鸭肠炎病毒单克隆抗体的制备及野毒株的分离鉴定，论文范文关键词：鸭肠炎病毒单克隆抗体的制备及野毒株的分离鉴定
鸭肠炎病毒单克隆抗体的制备及野毒株的分离鉴定毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：鸭肠炎病毒(DEV)鸭胚成纤维细胞适应毒经差速离心和蔗糖密度梯度离心法提纯，免疫Balb／c小鼠，取脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，经间接ELISA方法筛选，有限稀释法三次克隆，获得两株稳定分泌DEV单克隆抗体的杂交瘤细胞株1B_6和2G_8，经鉴定两株单抗分别为IgM和IgG（此处忽略..）1亚类，腹水效价均达到1∶10~7以上。利用细胞滴片技术，以制备的单抗2G_8为基础，建立单抗介导的间接免疫荧光(IFA)检测方法，并对DEV国内标准毒感染细胞进行动态间接IFA检测，分别取感染后6、12、24、36、48、60h细胞进行检测，均可见蓝绿色荧光，以感染后48h荧光最为明显。采用鸭胚成纤维细胞（略..）培养从山东和北京两地暴发的鸭瘟临床病例中分离到两株DEV，分别命名为SD和BJ。对SD株感染细胞进行间接IFA检测，可见明显的蓝绿色荧光，试验感染7日龄雏鸭可引起鸭肠炎的典型临床症状，死亡率为100％，取感染濒死期鸭肝脏、胰脏、法氏囊和脑组织制备石蜡包埋切片，利用单抗2G_（文章此处忽略..）8株进行免疫织化(IHC)检测，除脑组织外均得到阳性结果。根据在GenBank上已发表的DEV两段序列设计两对引物，目的片段大小分别为765bp和1954bp。采用聚合酶链式反应(PCR)对野毒SD株和BJ株肝脏病料核酸提取物进行扩增，均得到预期大小的片段，将短片段PCR产物纯化后直接测（略..）序，长片段克隆到Pmd18-TVector后进行测序，对各毒株序列分别与发表序列进行比较，长片段和短片段不同毒株间的碱基序列同源性分别达到99.73％和94.95％。

以上为本篇毕业论文范文鸭肠炎病毒单克隆抗体的制备及野毒株的分离鉴定的介绍部分。

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