HMGB1对奥沙利铂诱导的SGC-7901胃腺癌细胞凋亡影响

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HMGB1对奥沙利铂诱导的SGC-7901胃腺癌细胞凋亡影响

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毕业论文范文题目：HMGB1对奥沙利铂诱导的SGC-7901胃腺癌细胞凋亡影响，论文范文关键词：HMGB1对奥沙利铂诱导的SGC-7901胃腺癌细胞凋亡影响
HMGB1对奥沙利铂诱导的SGC-7901胃腺癌细胞凋亡影响毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景及目的:胃癌为我国常见恶性肿瘤之一,它的发生是由多因素参与,经历了多阶段的演变过程,涉及到多种蛋白的表达和功能异常;目前晚期胃腺癌的化疗效果差,一般认为胃腺癌细胞对化疗诱导凋亡不敏感。近期研究结果已经表明HMGB1在肿瘤细胞凋亡调控中起着重要的作用,HMGB1在一些恶性肿瘤(如结肠癌、胰腺癌、前列腺癌、恶性黑色素瘤、宫颈癌、胃癌、肝细胞癌等)的生长增殖和转移过程中异常表达,与肿瘤的发生发展、浸润转移、凋亡耐药以及新生血管的形成过程密切相关。HMGB1是调节肿瘤细胞自（此处忽略..）噬与凋亡的关键因子,一定程度上决定着肿瘤细胞在应激状态下是走向生存还是死亡,但其中分子机制尚不完全清楚。据此,本课题通过构建人HMGB1基因的真核表达载体,将其转染SGC-7901胃癌细胞进行表达,探讨转染HMGB1基因对奥沙利铂所致SGC-7901细胞凋亡的影响,为远期寻找克服胃腺癌对化疗诱导凋亡不敏感的新靶点奠定基础。方法:根据编码HMGB1蛋白的基因序列设计并合成引物,利用RT-PCR方法克隆得到HMGB1CDS基因片段,与PGEM-T-easy载体连接,经核苷酸序列分析后,进（略..）一步克隆到真核表达红色荧光载体pDsRED2-N1,限制性内切酶鉴定,再次经核苷酸序列分析连接无误,采用脂质体LipofectamineTM2000介导转染胃腺癌SGC-7901细胞,转染48H后倒置荧光显微镜下观察红色荧光表达、激光共聚焦显微镜检测HMGB1红色荧光融合蛋白胞内分布情况、Westernblot鉴定HMGB1蛋白表达情况;SGC-7901细胞经G418药物筛选获得稳定转染株,使用奥沙利铂在不同时间段处理胃腺癌细胞株SGC-7901和稳定转染株细胞,通过Annexin-V/PI染色法流式细胞术检（文章此处忽略..）测凋亡率。结果:核酸序列分析证实获得HMGB1CDS基因片段,没有发生无义突变。真核表达载体pDsRED2/HMGB1的限制性内切酶分析结果与预期一致。转染SGC-7901细胞后,经倒置荧光显微镜下观察到均匀明亮的红色荧光;激光共聚焦显微镜检测显示HMGB1红色荧光融合蛋白分布于细胞核内;Westernblot分析观察到HMGB1红色荧光融合蛋白特异性表达条带。流式细胞术分析发现使用奥沙利铂诱导胃癌细胞后,与普通SGC-7901细胞组对比,稳定转染组细胞显著下调了细胞凋亡坏死水平。结论（本文此处忽略..）:成功克隆HMGB1CDS基因片段,构建了真核表达载体pDsRED2/HMGB1,并在SGC-7901胃腺癌细胞中准确表达HMGB1红色荧光融合蛋白。获得了稳定表达pDsRED2/HMGB1重组质粒的SGC-7901胃腺癌细胞株,为深入研究HMGB1的生物学功能打下了坚实基础。过表达HMGB1蛋白可显著抑制奥沙利铂诱导的SGC-7901细胞凋亡。

以上为本篇毕业论文范文HMGB1对奥沙利铂诱导的SGC-7901胃腺癌细胞凋亡影响的介绍部分。

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