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镉致体外培养鸡胚脑神经元凋亡机理的研究

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毕业论文范文题目:镉致体外培养鸡胚脑神经元凋亡机理的研究,论文范文关键词:镉致体外培养鸡胚脑神经元凋亡机理的研究
镉致体外培养鸡胚脑神经元凋亡机理的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:本试验以体外培养鸡胚脑神经元为研究对象,在培养液中加入不同浓度CdCl2,通过对神经元活性检测、形态学观察、细胞凋亡、抗氧化功能、DNA损伤、Δψm、细胞内游离钙离子浓度、Caspase-3,9活性及细胞内CaM、Caspase-3mRNA表达水平等的检测,探讨了镉致鸡胚脑神经元凋亡的机理。研究结果表明:1.选用7d龄鸡胚分离脑神经细胞,采用四唑盐比色法(MTT法)和二硝基苯肼(此处忽略..)比色法观察CdCl2对鸡胚脑神经元活性的影响,结果表明CdCl2对鸡胚脑神经元具有毒性作用。2.采用流式细胞术检测磷脂酰丝氨酸(PS),AO/EB双荧光染色、HE染色、透射电镜观察镉致鸡胚脑神经元形态学变化、琼脂糖凝胶电泳、TUNEL法观察不同浓度CdCl2诱导鸡胚脑神经元凋亡情况,从不同角度证实CdCl2能够引发神经元凋亡。3.通过对细胞内抗氧化功能的检测,结果表明镉能够导致(本文此处忽略..)神经元NOS活性与NO含量升高,ROS含量增高,表明CdCl2能够破坏机体抗氧化防御系统及清除自由基功能,使鸡胚脑神经元发生氧化损伤,进而诱导其发生凋亡。4.应用碱性SCGE检测镉对鸡胚脑神经元DNA的损伤作用,结果证实CdCl2通过引起神经元内游离Ca2+浓度增加,激活内源性核酸内切酶导致DNA在核小体间断裂途径诱导神经元凋亡。5.应用流式细胞术检测Δψm,比色法检测C(本文此处忽略..)aspase-3,Caspase-9活性,荧光探针法检测鸡胚脑神经元内游离钙离子浓度,半定量RT-PCR法检测了神经元内Caspase-3mRNA、CaMmRNA表达水平。试验表明CdCl2导致鸡胚脑神经元游离钙离子浓度升高,干扰细胞钙离子的转运,导致细胞钙稳态失衡,使Δψm下降,Caspase-3,9活性上升,进而通过激活线粒体凋亡通路导致神经元凋亡。本试验从细胞、分子水(略..)平上探讨镉致禽类脑神经元性作用,揭示了镉能够降低神经元的活性、诱发氧化应激、损伤细胞DNA、干扰细胞钙稳态、影响细胞内基因表达、诱导细胞凋亡,阐明了镉致禽类脑神经元毒性机制,为畜禽镉中毒的防治提供了理论依据,丰富了毒理学和比较医学的资料,对保护畜牧业的健康发展,保护野生禽类,维持生态平衡具有重要意义。


以上为本篇毕业论文范文镉致体外培养鸡胚脑神经元凋亡机理的研究的介绍部分。
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