硫酸鱼精蛋白介导的鼠膀胱粘膜上皮损伤模型的建立及其相关机制的研究

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硫酸鱼精蛋白介导的鼠膀胱粘膜上皮损伤模型的建立及其相关机制的研究

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毕业论文范文题目：硫酸鱼精蛋白介导的鼠膀胱粘膜上皮损伤模型的建立及其相关机制的研究，论文范文关键词：硫酸鱼精蛋白介导的鼠膀胱粘膜上皮损伤模型的建立及其相关机制的研究
硫酸鱼精蛋白介导的鼠膀胱粘膜上皮损伤模型的建立及其相关机制的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的：1.通过膀胱内灌注硫酸鱼精蛋白建立膀胱上皮急性和慢性损伤动物模型。2.研究损伤后膀胱上皮细胞,GAGs层,粘膜通透性和肥大细胞的改变及其相互关系,为膀胱炎性疾病,特别是IC的研究奠定了基础。材料与方法：1.实验对象成年雌性SD大鼠,鼠龄6-8周,体重228-267g。2.主要试剂硫酸鱼精蛋白粉剂(ProtaminesulfateGradeX):SIGMA公司；山羊抗大鼠S-GAGELISA试剂盒,山羊抗大鼠HAELISA试剂盒：ADL公司；高碘酸-无色品红染色试剂盒：广州市俪科贸有限公司；2x106cmp/ml碳14标记尿素溶液：由天津放射学研究所提供。3.方法膀胱损伤模型的建立,通过膀胱内灌注50mg/mlPS0.4ml,膀胱内保留30分钟建立SD大鼠短期损伤模型；通过膀胱内灌注50mg/mlPS0.4ml,膀胱内保留30分钟,60分钟后重复一次,处理后间隔两天并以此作为一（文章此处忽略..）次处理周期,共进行20个周期处理以建立SD大鼠长期损伤模型。模型建立后分别对短期、长期损伤模型行HE染色,甲苯胺蓝染色,透射电镜检查。对短期损伤模型行尿液GAGsELISA测定,高碘酸-希夫染色(PAS)和粘膜通透性测定。4.统计与分析采用SPSS16.0统计软件对实验数据进行统计处理,两组独立样本采用Student't检验,同组内不同时间点数据比较采用单因素方差分析,以P0.05为差异有显著性。结果：1.通过50mg/ml硫酸鱼精蛋白单次灌注膀胱建立SD大鼠膀胱急性损伤模型。模型中膀胱表面上皮细胞脱落；伞状细胞结构和上皮细胞间紧密连接复合体被破坏；表层上皮细胞游离表面微绒毛形成；粘膜下层、肌层间出现多形性中性粒细胞等急性炎症细胞侵润,偶见肥大细胞侵润,与对照组相比差异无统计学意义,t=0.041(P0.05)；组织水肿、血管充血明显。损伤7天后膀胱壁形态改变（此处忽略..）基本恢复正常。2.通过50mg/ml硫酸鱼精蛋白反复膀胱灌注,持续60天,建立SD大鼠膀胱慢性损伤模型。慢性损伤模型在膀胱急性损伤的基础上,出现膀胱壁增厚；膀胱组织间出现大量淋巴细胞和肥大细胞,肥大细胞计数与对照组相比差异具有统计学意义,t=7.344(P0.05)。电镜下移行细胞游离腔面结构低平,失去扇贝样外观,细胞间隙增宽十分明显,肥大细胞以脱颗粒或部分脱颗粒为主；并且上述改变持续存在。膀胱表现出损伤,修复,增殖并存的状态。3.PAS染色表明SD大鼠膀胱上皮细胞表面存在着一层连续均一的PAS+GAGs层。PS单次处理1天后上皮细胞表面PAS+层消失,处理3天后GAGs层断续存在,处理7天后膀胱粘膜层GAGs恢复连续均一的形态。单次PS处理使尿中S-GAGs水平在损伤后第1天,t=2.174(P0.05)；第7天增高,t=3.517(P0.01)。HA在损伤后第1天在尿中升高,t=2.872(P0.（此处忽略..）05)。损伤后上皮细胞启动修复机制,上皮层内中间细胞成熟为伞状细胞同时伴有GAGs合成的增加。4.单次PS处理后第1天,伴随GAGs层的破坏,膀胱粘膜层对尿素通透性增加,与对照组相比差异具有统计学意义,t=2.915(P0.05)。处理后第7天膀胱粘膜对尿素的通透性在损伤组和对照组中差异无统计学意义,t=0.550(P0.05),膀胱上皮细胞恢复对尿中小分子溶质的不通透性。结论：1、尿液中溶质对膀胱组织具有毒性。伞状细胞表面的特化结构和上皮细胞间紧密连接的完整性是维持尿液对膀胱不通透性的结构基础。膀胱尿路上皮细胞的损伤,为整个损伤的核心环节,随后的膀胱炎症和肥大细胞活化都是上皮细胞损伤的继发过程。2、膀胱上皮细胞表面S-GAG及其结合的水分子层是其下膀胱表面伞状细胞和细胞间紧密连接的重要保护机制,其可以将尿中小分子毒性溶质如尿素排斥在膀胱表面以外。S-GAG被PS（文章此处忽略..）中和,直接导致水分子层受损是上皮细胞损伤的触发因素。S-GAG的溶解和HA的降解可能还参与了损伤后的炎症反应和损伤修复。3、膀胱内灌注硫酸鱼精蛋白介导的膀胱粘膜上皮急性和慢性损伤模型中大鼠膀胱组织结构,GAGs成分和通透性发生短暂或持续的改变。上述改变尤其是慢性模型中的变化与在IC患者中见到的相似,为上皮细胞功能障碍在IC发病机制中发挥重要作用提供了依据。同时膀胱上皮损伤模型的建立为腺性膀胱炎,放射性膀胱炎的其他膀胱炎性疾病的研究提供了成熟的模型基础。

以上为本篇毕业论文范文硫酸鱼精蛋白介导的鼠膀胱粘膜上皮损伤模型的建立及其相关机制的研究的介绍部分。

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