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Id1在血管瘤发病中的作用及其机制探讨

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毕业论文范文题目：Id1在血管瘤发病中的作用及其机制探讨，论文范文关键词：Id1在血管瘤发病中的作用及其机制探讨
Id1在血管瘤发病中的作用及其机制探讨毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：血管瘤是发生于婴幼儿的最常见的良性肿瘤之一,主要由紊乱的血管和大量不成熟的内皮细胞组成。发病率高达10～12%,严重影响患儿容貌、受累器官的功能、心理健康等,现代医学主张以积极的态度对该病进行早期治疗。但由于对其发病机制缺乏足够的认识,致使治疗效果整体上差强人意。Id(DNA结合抑制因子/分化抑制因子)属于转录调节因子家族,它通过作用于多种信号传导而抑制细胞分化,促进增生和转移,在细胞恶变和转移过程中发挥了关键作用.哺乳动物细胞含4种Id因子(Id1、Id2、Id3、Id4),这些因子参与细胞周期调节过程,包括细胞发育、成熟、生长、分化和凋亡等,其中Id1与肿瘤发生的关系最为密切。Id1通过抑制细胞分化,推进细胞周期进程、诱导细胞增殖、抑制衰老、诱导侵袭、参与肿瘤性血管新生而介导肿瘤的发生和发展。鉴于Id1对于肿瘤中血管新生方面的突出作用,笔者将目光锁定在以大量紊乱的血管及不成熟内皮细胞为主要标志（略..）的的血管瘤上面。通过临床标本上检测Id1在血管瘤中的表达情况,并对体外培养的血管瘤细胞进行RNA干扰,以研究Id1在血管瘤发病中的作用并对其机制进行探讨。材料与方法：第一部分：用免疫组化分别检测12例增生期血管瘤、10例消退期血管瘤、9例血管畸形、7例淋巴管畸形组织及4例动静脉畸形中的Id1的表达。将增生期血管瘤组织及瘤周正常皮肤组织分别用Trizol裂解液提取总RNA,将总RNA逆转录为cDNA,然后用Id1引物进行(Real-timefluorescencequantitativePCR,RFQ-PCR)实验,检测两种组织中Id1基因的mRNA表达情况,再取增生期血管瘤组织及瘤周正常皮肤组织,常规提取总蛋白,一抗二抗孵育,进行Westernblot实验,检测两种组织中的蛋白表达情况。第二部分：用组织块培养的方法培养增殖期血管瘤内皮细胞,在细胞生长的对数期,用设计好的Id1干扰慢病毒(Id1-R（文章此处忽略..）NAi-lentivirus)及空载体慢病毒(Id1-NC-lentivirus)分别进行转染,用荧光观测、RFQ-PCR、Westernblot确认干扰成功,用MTT比色法描记干扰前后细胞生长曲线的变化、用TUNEL检测干扰前后细胞凋亡的改变,用WESTERNblot及PCR检测干扰前后HIF-1α水平的改变,用免疫组化的方法定性检测干扰前后iNOS表达的改变；用ELISA检测干扰前后VEGF的改变。用Tubeformation观测干扰前后血管瘤内皮细胞成管能力的改变。结果：第一部分：免疫组化结果显示增生期血管瘤组织中Id1表达整体呈强阳性,阳性率高达90.3%.消退期血管瘤Id1表达整体呈弱阳性趋势,阳性率53%；血管畸形、淋巴管畸形及动静脉畸形整体阳性率较弱,依次为52%、57%、53.7%。RFQ-PCR显示增生期血管瘤组织中Id1的(?)nRNA水平明显高于瘤周正常皮肤组织。Westernblot显示增生期（本文此处忽略..）血管瘤组织中Idl的蛋白表达水平明显高于瘤周正常皮肤组织。第二部分：实验结果显示荧光观测、RFQ-PCR、Westernblot确认干扰成功。MTT比色法描记的干扰前后细胞生长曲线结果显示：干扰后hemECs增殖能力下降,与未干扰组有显著差异。TUNEL检测干扰前后细胞凋亡结果显示：干扰后hemEC凋亡明显增多,与未干扰组有显著差异。RFQ-PCR及WESTERNblot检测干扰前后HIF-1α含量变化显示：干扰后HIF-1αRNA水平并无明显降低,但蛋白含量减少,与未干扰组有明显差异。免疫组化的方法定性检测干扰前后iNOS表达的改变,发现干扰后iNOS整体阳性率下降,阳性强度变弱。ELISA检测干扰前后VEGF的改变,结果显示,干扰后VEGF的含量减少,与对照组有明显差异。Tubeformation观测干扰前后血管瘤内皮细胞成管能力的改变,结果显示干扰后成管能力下降（文章此处忽略..）,且成管持续时间减少,管壁消退快,与对照组相比有明显差异。结论：第一部分：实验结果提示,Idl在淋巴管畸形、静脉畸形、动静脉畸形仅在有管腔结构的部位表达,其余部分不表达或低表达,Id1在增生期血管瘤组织中呈现高表达,在消退期血管瘤中低表达,且表达强度随消退成分的多少而改变。增生期血管瘤中Id1的表达在RNA水平及蛋白水平均高于瘤周正常皮肤组织,提示Id1在血管瘤发病中或起重要的作用。第二部分：结果显示沉默Id1后,血管瘤内皮细胞的增殖及成血管能力降低,但凋亡增多。而其下游分子HIF-1α、VEGF、iNOS的含量降低,提示干扰Id1之后,导致通路上的因子含量发生改变,从而导致血管瘤内皮细胞增殖、凋亡、成血管能力的改变,诱发血管瘤的消退。

以上为本篇毕业论文范文Id1在血管瘤发病中的作用及其机制探讨的介绍部分。

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