加味三棱丸对大鼠异位内膜细胞凋亡及其机制的研究

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加味三棱丸对大鼠异位内膜细胞凋亡及其机制的研究

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毕业论文范文题目：加味三棱丸对大鼠异位内膜细胞凋亡及其机制的研究，论文范文关键词：加味三棱丸对大鼠异位内膜细胞凋亡及其机制的研究
加味三棱丸对大鼠异位内膜细胞凋亡及其机制的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：子宫内膜异位症(Endometriosis,EMS,简称内异症)是妇科顽症,病因复杂,且与恶性肿瘤密切相干,被世界卫生组织(WHO)列为疑难病症之一。目前医治本病多以激素类药物、手术为主。因为长期激素医治伴随的假孕、假绝经景象,以及手术医治适应症的限度跟并发症的产生,给患者身材跟心理健康造成了很多不良影响。中医药根据辩证论治,在缓解临床症状、调经助孕等方面有其独特疗效,且毒副作用小,可长期服用。因此寻找疗效坚固的中药制剂,并探讨其作用机理存在重要的研究价值。三棱丸最早见于《教训良方》,是由三棱、莪术两味活血化瘀中药组成,用于瘀血经闭,行经腹痛,癥瘕积聚,食积腹痛。异位子宫内膜细胞在宫腔外种植并存活,与其自发性凋亡减弱或对凋亡信号不敏感等特点改变有关。本课题从细胞凋亡的角度察看活血化瘀方加味三棱丸重要成份(简称SLW)医治子宫内膜异位症的疗效并探讨其作用机制。目标察看加味三棱丸重要成分对子宫内膜异位症大鼠异位内膜的发展及其细胞凋亡的影响;察看加味三棱丸重要成分对抗凋亡基因Bcl-2mRNA跟引诱细胞凋亡的基因FasmRNA的作用。探讨加味三棱丸重要成分医治子宫内膜异位症的疗效及引诱异位内膜细胞凋亡的机制。方法:1、动物模型的制造选取健康雌性Wistar大鼠50只,体重180～220g,每天定时察看阴道细胞涂片,抉择动情周期4～5天并持续有2个动情周期的雌性大鼠,于动情期(阴道细胞涂片为角化上皮细胞时)行造模手术。以5%水合氯醛(0.7ml/100g)腹腔打针麻醉,惯例消毒,在无菌前提下开腹,（本文此处忽略..）结扎右侧子宫两端后,从远端剪取长约1.5㎝的子宫段,剔除脂肪组织,剪成5mm×5mm的子宫组织3块。一块送病理测验(确证为子宫组织),另外两块凑近腹膜血管处,缝于腹壁,以粘膜面朝向腹膜,浆膜面朝向腹腔,关腹。每鼠腹腔打针庆大霉素0.1ml×3天。畸形干净豢养。2、模型纳入的标准建模后4周,察看阴道细胞学涂片,第二次剖腹察看异位子宫内膜的成长情况,并用游标卡尺测量移植灶大小。假如移植灶体积增大,体积≥8mm3,呈隆起透亮的结节状、囊状,被结缔组织或大网膜覆盖并有血管构成,内有淡黄色透明囊液积聚。切取移植灶送检,证明移植灶中有子宫内膜上皮细胞、腺体及间质的成长。3、实验分组与用药除畸形对比组外,另将造模成功的大鼠随机分为SLW0.11mg.kg-1.d-1组、0.34mg.kg-1.d-1组、1.02mg.kg-1.d-1组、0.5mg.kg-1.d-1孕三烯酮组、模型对比组,灌胃给药,每天1次,持续4周。4、检测指标4周后结束医治,察看阴道细胞学涂片后处死大鼠,第三次剖腹察看异位内膜成长情况,并测量移植灶体积。切取在位子宫与异位子宫内膜,HE染色进行状况学病理检察。TUNEL法检测异位内膜细胞凋亡,原位杂交检测凋亡调控基因Bcl-2跟FasmRNA的表白。成果:1、SLW对大鼠异位内膜组织成长的影响用药4周后,模型对比组移植灶体积比4周前略大,呈隆起透亮的小泡状,名义血管清楚可见,内部充斥积液。而孕三烯酮组跟SLW0.11mg.kg-1.d-1组、0.34mg.kg-1.d-1组、1.02mg.kg-1.d-1组移植灶体积明显缩小,囊泡名义色彩（本文此处忽略..）黯淡,个别移植灶色彩泛黄,浮现萎缩状。2、SLW对大鼠异位内膜组织显微构造的影响HE染色,光镜下察看。移植的子宫内膜组织成活,构成的囊壁由内向外分辨为上皮细胞层、间质细胞层及少量纤维结缔组织,囊内为少量沉没的白细胞跟黏液。模型对比组异位内膜腺上皮细胞呈高柱状或矮柱状,排列在囊泡内腔面,细胞间连接较周到,细胞核大,呈卵形,位于基底部,胞浆丰富。内膜间质也丰富,其中有个别部位上皮层内陷构成假腺体。SLW1.02mg.kg-1.d-1组、0.34mg.kg-1.d-1组跟孕三烯酮组,内膜腺上皮层明显变薄,细胞呈矮柱状甚至扁平状,疏松排列,核不规矩,地位不定,胞浆嗜碱性增加。内膜间质也明显减少,腺体少甚至缺失。3、SLW对大鼠异位内膜组织体积的影响用药前,各组大鼠异位内膜病灶体积经统计学处理无明显性差别(P0.05)。用药4周后,孕三烯酮组跟SLW1.02mg.kg-1.d-1组、0.34mg.kg-1.d-1组、0.11mg.kg-1.d-1组异位内膜体积分辨为17.01mm3、18.42mm3、25.90mm3、58.34mm3,体积明显缩小,与模型对比组102.17mm3比拟均有明显性差别(P0.05)。而模型对比组异位内膜体积比4周前略有增加,但无明显性差别(P0.05)。成果显示:加味三棱丸可明显缩小异位内膜体积。4、SLW对大鼠异位内膜细胞凋亡的影响用药4周后,异位内膜组织切片在荧光显微镜下,以520±20nm波长察看,可见绿色荧光所标记的凋亡细胞。共聚焦激光扫描,显示凋亡细胞核裂解,凋亡小体(凋亡细胞特点性的状况学改变)构成。模型对比组均匀荧光强度值0.1457比畸形对比组0.1892明显降落(P0.05),（文章此处忽略..）模型对比组异位内膜细胞凋亡减少,成长失衡。而孕三烯酮组跟SLW1.02mg.kg-1.d-1组、0.34mg.kg-1.d-1组、0.11mg.kg-1.d-1组均匀荧光强度值分辨为0.2315、0.2246、0.2209、0.1955,与模型对比组0.1457比拟,其均匀荧光强度值均明显增高(P0.05)。成果显示:加味三棱丸能促进异位内膜细胞凋亡。5、SLW对大鼠异位内膜组织Bcl-2mRNA表白的影响用药4周后,原位杂交成果显示,抗凋亡基因Bcl-2mRNA阳性表白的细胞染色为棕黄色,重要分布在腺上皮细胞跟间质细胞的胞浆、胞膜跟核膜。模型对比组异位内膜组织Bcl-2mRNA呈阳性表白,且多数为强阳性表白,其均匀光密度值0.1728与畸形对比组0.1491比拟有明显性差别(P0.05)。孕三烯酮组跟SLW1.02mg.kg-1.d-1组、0.34mg.kg-1.d-1组、0.11mg.kg-1.d-1组异位内膜组织Bcl-2mRNA的表白较模型对比组明显减少,其均匀光密度值分辨为0.1014、0.1055、0.1102、0.1370,与模型对比组0.1728比较均有明显性差别(P0.05)。成果显示:加味三棱丸能降落异位内膜组织抗凋亡基因Bcl-2mRNA的表白,从而促进异位内膜细胞凋亡。6、SLW对大鼠异位内膜组织FasmRNA表白的影响用药4周后,原位杂交成果显示,凋亡基因FasmRNA阳性表白的细胞染色为棕黄色,重要分布在内膜间质细胞的胞浆、胞膜。模型对比组异位内膜组织FasmRNA仅有少量表白,且染色较浅,其均匀光密度值0.0883与畸形对比组0.0912比拟无明显性差别(P0.05)。而各医治组异位内膜组织FasmRNA的表白均较模型对比组有不同程度的增加,孕三烯酮组跟（略..）SLW1.02mg.kg-1.d-1组、0.34mg.kg-1.d-1组、0.11mg.kg-1.d-1组均匀光密度值(0.1242、0.1206、0.1164、0.0966)与模型对比组(0.0883)比较,差别有明显性(P0.05)。成果显示:加味三棱丸能增加异位内膜组织凋亡基因FasmRNA的表白,从而引诱异位内膜细胞凋亡。论断:1、加味三棱丸可克制大鼠子宫内膜异位症的发展,缩小异位内膜体积,改良异位内膜病理学显微构造,促进异位内膜细胞凋亡。2、加味三棱丸克制大鼠子宫内膜异位症发展的机制,与其克制异位内膜组织抗凋亡基因Bcl-2mRNA表白、增加凋亡基因FasmRNA表白,从而引诱异位内膜细胞凋亡有密切相干。

以上为本篇毕业论文范文加味三棱丸对大鼠异位内膜细胞凋亡及其机制的研究的介绍部分。

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