LPS对羧酸酯酶1跟2（CES1、CES2）表白的研究

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LPS对羧酸酯酶1跟2（CES1、CES2）表白的研究

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毕业论文范文题目：LPS对羧酸酯酶1跟2（CES1、CES2）表白的研究，论文范文关键词：LPS对羧酸酯酶1跟2（CES1、CES2）表白的研究
LPS对羧酸酯酶1跟2（CES1、CES2）表白的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：羧酸酯酶(Carboxylesterases,CES)属于由多基因调控的α/β折叠蛋白水解酶超家族,属I相药物代谢酶,广泛分布于各种组织中。其中,肝脏表白CES1跟CES2两种羧酸酯酶以CES1为主,肠道则重要表白CES2。羧酸酯酶在水解代谢多种药物(包含前体药物)的过程中发挥重要作用。已有研究表明,炎症跟感染等病理状况下,肝脏中多种药物代谢酶的表白程度降落,活性降落,造成药物清除率降落,进而引起血浆药物浓度增高产生药物毒性反应。细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是革兰阴性菌细胞壁的重要组成成分,广泛存在于人跟动物的消化道中。LPS被广泛用来树破动物败血症模型研究炎症跟感染对药物代谢酶表白及活性的影响。本文首先从整体程度研究了LPS造成的炎症状况对小鼠肝脏、肠道组织CES1跟CES2表白程度及活性的影响;接着在细胞程度研究了LPS对人肝癌细胞株HepG2HCE1跟HCE2表白的影响,最后研究了HCE1跟HCE2表白变更对其底物药物氯吡格雷跟伊破替康作用及毒性反应带来的影响。上述实验成果表明,炎症状况可（本文此处忽略..）能下调小鼠肝脏、肠道组织羧酸酯酶的表白及活性。LPS预处理人肝癌细胞株HepG2后改变药物的作用及毒性反应,阐明炎症状况可明显影响药物的疗效。本研究成果为领导临床公道用药提供了实际根据。公道的药物剂量,既可能进步疗效,避免用药适量,又可能节俭资源,产生社会跟经济效益。第一部分LPS对小鼠肝脏、肠道组织羧酸酯酶1跟2表白影响的研究为了研究炎症状况对CES1跟CES2表白及活性的影响,咱们用LPS树破小鼠炎症状况模型。取小鼠肝脏、肠道组织用qRT-PCR技巧检测CES1跟CES2mRNA的表白。成果显示LPS处理组小鼠肝脏CES1跟CES2的mRNA表白分辨比对比组降落了96%跟92%,差别均有统计学意思(P0.05);LPS处理组小鼠肠道CES1跟CES2的mRNA的表白分辨比生理盐水组降落75%跟87%,差别均有统计学意思(P0.05)。接着咱们用WesternBlotting方法检测小鼠肝脏、肠道组织CES1跟CES2的蛋白表白变更。实验成果显示LPS处理后小鼠肝脏CES1跟CES2的蛋白表白程度分辨比对比组降落62%跟58%,肠道组织CES1跟CES2的蛋白表白程度分辨比对比（本文此处忽略..）组降落35%跟42%,差别均有统计学意思(P0.05)。最后咱们检测小鼠肝脏、肠道组织CES1跟CES2的表白降落是否影响羧酸酯酶的水解活性。取小鼠肝脏、肠道组织蛋白样品,通过水解通用底物硝基苯基乙酸酯(PNPA)来检测羧酸酯酶的总活性。与小鼠肝脏、肠道组织CES1跟CES2表白程度降落趋势一致,炎症状况下小鼠肝脏羧酸酯酶的总活性值为1.572±0.319nmol/mg/min,明显低于对比组值3.269±0.228nmol/mg/min(P0.05)。LPS处理组小鼠肠道羧酸酯酶的总活性值为0.413±0.082nmol/mg/min,也明显低于生理盐水组值0.885±0.102nmol/mg/min(P0.05)。上述研究成果表明,炎症状况降落小鼠肝脏、肠道组织CES1跟CES2的表白程度,影响其功能即降落羧酸酯酶的总水解活性。第二部分LPS对人肝癌细胞株HepG2羧酸酯酶1跟2表白的影响及对其底物药物作用的研究通过第一部分的研究,咱们发明LPS可能降落小鼠肝脏、肠道组织CES1跟CES2的表白程度,影响其功能即降落羧酸酯酶的水解活性。那么CES1跟CES2表白及活性的降落是否会给临床用药带来影响?接下来咱们以人肝癌细胞（此处忽略..）株HepG2为研究对象,在细胞程度研究LPS对HCE1跟HCE2蛋白表白的影响。Westernblotting成果显示,LPS处理人肝癌细胞株HepG2后可明显降落其HCE1跟HCE2的蛋白表白程度。此外,为察看人肝癌细胞株HepG2经LPS处理后对相应底物药物氯吡格雷跟伊破替康的水解才能是否产生变更?咱们用分光光度计检测了细胞蛋白样品水解硝基苯基乙酸酯(PNPA)的才能,成果显示,蛋白样品总的水解活性明显降落。文献报道,HCE1水解抗凝药氯吡格雷后可降落其毒性反应,因为本相药物比其代谢产物更具毒性;相反,抗肿瘤药伊破替康经HCE2水解后的代谢产物毒性比其本相药物大。因此,咱们揣测,用LPS预处理细胞会增加氯吡格雷的细胞毒性,降落伊破替康的细胞毒性。为察看LPS降落HCE1跟HCE2的蛋白表白程度是否改变其底物药物的作用跟毒性反应,咱们用不同浓度的抗凝药氯吡格雷跟抗肿瘤药伊破替康处理HepG2细胞48h,用MTT法测定细胞活力并拍照察看细胞状况学的变更。实验成果显示,LPS预处理组与无LPS预处理组的细胞活力有明显差别:抗（此处忽略..）凝药氯吡格雷对LPS预处理细胞的毒性作用大于未用LPS预处理的细胞;相反,抗肿瘤药伊破替康对LPS预处理细胞的毒性作用小于未用LPS预处理的细胞,状况学实验成果表明,用氯吡格雷作后处理,LPS预处理的细胞状况产生明显的变更,如皱缩、凑集等,而无LPS预处理的细胞状况则濒临畸形。用伊破替康作后处理的细胞实验成果与氯吡格雷相反。细胞后续处理的状况学变更成果与细胞活力实验成果一致。通过LPS对CES1跟CES2表白及活性影响的研究,证明了炎症状况可下调药物代谢酶的表白及活性。通过MTT跟状况学实验证明了炎症状况下调羧酸酯酶的表白可改变其底物药物的作用跟毒性反应。本研究成果为领导临床公道用药提供了实验根据。

以上为本篇毕业论文范文LPS对羧酸酯酶1跟2（CES1、CES2）表白的研究的介绍部分。

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