藤稔葡萄花发育相关基因的克隆及表达分析

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藤稔葡萄花发育相关基因的克隆及表达分析

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毕业论文范文题目：藤稔葡萄花发育相关基因的克隆及表达分析，论文范文关键词：藤稔葡萄花发育相关基因的克隆及表达分析
藤稔葡萄花发育相关基因的克隆及表达分析毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：为解释植物开花这一复杂生命现象,近百年来科研工作者对成花机理进行了大量积极的探索。花发育的研究从生理生化层次逐步深入到分子水平。植物成花分子机理已在拟南芥、金鱼草等模式植物上取得了重要进展,大量功能基因得到分离鉴定,形成了复杂而精确的遗传调控网络,其中FLOWERINGLOCUST、FLOWERINGLOCUSC、APETALA3、AGAMOUS是调控成花时间及植物花器官原基分化与发育的四个关键基因。不同种类植物中这四个基因的同源基因在序列特征、表达模式和功能上具有相对保守性和不同程度的差异性。果树成花分子机理的研究起步较晚,相对落后。本实验以藤稔葡萄(Vitisvinifera×Vitislabrusca'Fujimino（本文此处忽略..）ri')为实验材料,克隆得到葡萄FLOWERINGLOCUST、FLOWERINGLOCUSC,APETALA3.AGAMOUS四个同源基因的cDNA序列及这四个基因上游的启动子序列,并通过相关软件,对它们的结构和功能进行了分析。同时对这四个基因在葡萄花期不同阶段的表达特性进行了初步研究。以期为深入了解葡萄花形态建成过程,调控葡萄的开花结实提供分子生物学基础。主要研究结果如下：1.采用克隆红富士葡萄FLOWERINGLOCUST、FLOWERINGLOCUSC、APETALA3和AGAMOUS全长编码区相同的引物,以藤稔葡萄花序的总RNA为模板,通过RT-PCR和3'RACE扩增得到这四个基因的cDNA序列。经过拼接得到藤稔葡萄F（此处忽略..）T基因cDNA序列长度为757bp(GenBank登录号HM192810),包含一个完整的525bp的开放阅读框,编码174个氨基酸残基。藤稔葡萄FLC基因cDNA序列长度为1038bp(GenBank登录号HM192809),包含一个完整的632bp的开放阅读框,编码210个氨基酸残基。藤稔葡萄AP3基因cDNA序列长度为1049bp(GenBank登录号HM192808),包含一个完整的681bp的开放阅读框,编码226个氨基酸残基。藤稔葡萄AG基因cDNA序列长度为1123bp(GenBank登录号HM192807),包含一个完整的681bp的开放阅读框,编码226个氨基酸残基。同时对这四个基因的生物信息学特性进行了初步分析。2.通过基于热不对称交错PCR的基因组步移法从藤稔葡萄中获得FLOWERINGLOCUST同源基因上游核酸片段长度为1605bp,包含有基因区（此处忽略..）域135bp,实际的启动子区域长1470bp(GenBank登录号HM192806)。获得的FLOWERINGLOCUSC同源基因上游核酸片段长度为1788bp,包含有基因区域90bp,实际的启动子区域长1698bp(GenBank登录号HM192805)。获得的APETALA3同源基因上游核酸片段长度为1143bp,包含有基因区域82bp,实际的启动子区域长1061bp(GenBank登录号HM192804)。获得的AGAMOUS同源基因上游核酸片段长度为1254bp,包含有基因区域122bp,实际的启动子区域长1132bp(GenBank登录号HM192803)。经Plantcare在线预测表明这4个片段均含有启动子的特定结构及多个转录因子结合位点。3.以藤稔葡萄为材料,研究了FLOWERINGLOCUST、FLOWERINGLOCUSC,APETALA3和AG（本文此处忽略..）AMOUS基因在葡萄花期的表达规律,结果表明,FT基因的表达量在藤稔葡萄整个花期稳步下降,但花前急剧上升,尤其是开花当天表达量达到最高值。FLC的表达量与FT相反,呈现较明显的先升后降的趋势。AP3在花期各阶段的表达量整体水平均不高,并呈缓慢下降的趋势。AG也呈现较明显的先升后降的趋势,在花前几天持续高表达。

以上为本篇毕业论文范文藤稔葡萄花发育相关基因的克隆及表达分析的介绍部分。

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