南方根结线虫编码Ras蛋白基因let-60的克隆与功能初步分析

搜索高级搜索

原创毕业论文

南方根结线虫编码Ras蛋白基因let-60的克隆与功能初步分析

作者: 浏览:5次

免费专业论文
政治工作论文
计算机论文
营销专业论文
工程管理论文范文
医药医学论文范文
法律论文范文
生物专业论文
物理教学论文范文
人力资源论文范文
化学教学论文范文
电子专业论文范文
历史专业论文
电气工程论文
社会学专业论文
英语专业论文
行政管理论文范文
语文专业论文
电子商务论文范文
焊工钳工技师论文
社科文学论文
教育论文范文
数学论文范文
物流论文范文
建筑专业论文
食品专业论文
财务管理论文范文
工商管理论文范文
会计专业论文范文
专业论文格式
化工材料专业论文
英语教学专业论文
电子通信论文范文
旅游管理论文范文
环境科学专业论文
经济论文
人力资源论文范文
营销专业论文范文
财务管理论文范文
物流论文范文
财务会计论文范文
数学教育论文范文
数学与应用数学论文
电子商务论文范文
法律专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文
计算机专业论文
环境艺术专业论文
信息计算科学专业
物流专业论文范文
人力资源论文范文
教育管理论文范文
现代教育技术论文
小学教育论文范文
机械模具专业论文
报告,总结,申请书
理工科专业论文
心理学论文范文
学前教育论文范文

毕业论文范文题目：南方根结线虫编码Ras蛋白基因let-60的克隆与功能初步分析，论文范文关键词：南方根结线虫编码Ras蛋白基因let-60的克隆与功能初步分析
南方根结线虫编码Ras蛋白基因let-60的克隆与功能初步分析毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：Ras蛋白是一个分子质量为21kDa左右的单体GTP酶,具有两种构象:GTP结合构象(Ras.GTP)及GDP结合构象(Ras.GDP),这两种构象在一定条件下可发生互变。由生长因子介导的Ras信号传导途径是诸多信号途径中与细胞增殖、分化密切相关的重要信号途径。受体型TPK/Ras/MAPK信号转导途径是目前研究的最为广泛的受Ras蛋白调节的信号传导途径。目前,TPK/Ras/MAPK信号传导途径在秀丽杆线虫(Caenorhabditiselegans)中研究的最为清楚:Ras信号途径对于许多发育进程是必需的,包括阴门、子宫、交合刺、P12以及排泄管细胞的诱导分化;控制着性肌原细胞迁（本文此处忽略..）移、轴突导向;对细胞减数分裂粗线期具有促进作用。为了研究Ras信号途径对于根结线虫生长发育的调控作用以及探索新的防治根结线虫的策略,本研究克隆了南方根结线虫编码Ras蛋白的基因let-60,对其编码蛋白的氨基酸序列、基因组中的拷贝数、内含子、等基因结构特性以及不同虫态中的表达,基因原核表达等进行了分析,并利用RNAi技术对let-60的功能进行了初步验证。主要研究结果如下:1.以南方根结线虫为材料,利用同源扩增和RACE法克隆了包含开放阅读框和3’端PolyA结构的let-60cDNA序列。开放阅读框序列全长为546bp,编码181个氨基酸,预测蛋白分子量大约是21.008KDa,等电点6.91,GenBa（略..）nk登录号为FJ176739。根据南方根结线虫基因组测序结果可知,let-60具有8个内含子,9个外显子,且在南方根结线虫基因组中为多拷贝。本实验采用PCR扩增DNA全长,并通过Southern杂交对测序结果进行验证,试验结果与基因组测序结果一致,进一步证明了南方根结线虫基因中编码Ras蛋白基因序列只有一个。利用生物信息学软件对Ras蛋白结构进行预测,结果显示Ras蛋白为典型GTP酶,不含有跨膜结构和信号肽序列。2.通过双酶切、连接,构建let-60的表达载体,将let-60基因成功地克隆到表达载体pET-28a(+)多克隆区域上。在30℃下培养,利用0.4mmol/L和0.8mmol/LIPTG在大肠杆菌BL21(D（本文此处忽略..）E3)菌株中能够诱导目的融合蛋白pET-28a(+)-let-60的表达,所得的pET-28a-let-60的原核表达为下一步提纯融合蛋白、Westernblot、验证GTP酶活性提供了依据。3.以南方根结线虫卵、二龄幼虫、寄生态虫体为材料,利用RT-PCR技术对let-60在不同发育态虫体中的表达进行了分析。结果显示,let-60在南方根结线虫卵期、二龄幼虫期、寄生期,均有显著表达,说明Ras蛋白在南方根结线虫孵化和寄生过程可能都具有调控作用。4.将南方根结线虫二龄幼虫浸泡在含有1%间苯二酚,2mg/mllet-60dsRNA溶液中6h,分别以gfpdsRNA溶液、M9buffer、清水做为对照。同时做两组,I（文章此处忽略..）组将处理过的2龄幼虫接种到番茄根部,II组用于半定量RT-PCR分析。60天后统计番茄根部的根结数、卵块数、每卵块平均卵数及孵化率。方差分析结果显示,处理与对照之间根结数差异显著,卵块数差异极显著,对照之间均无显著差异,四个处理之间平均卵数及孵化率均无显著差异。半定量RT-PCR分析表明靶标mRNA表达量明显降低。上述研究结果表明let-60基因在南方根结线虫的发育和寄生中具有重要的调控作用。

以上为本篇毕业论文范文南方根结线虫编码Ras蛋白基因let-60的克隆与功能初步分析的介绍部分。

本论文在免费论文栏目，由论文网(www.zjwd.net)整理,更多论文,请点论文范文查找

收费专业论文
汉语言文学论文
物理学论文
自动化专业论文
测控技术专业论文
历史学专业论文
机械模具专业论文
金融专业论文
电子通信专业论文
材料科学专业论文
英语专业论文
会计专业论文
行政管理专业论文
财务管理专业论文
电子商务国贸专业
法律专业论文
教育技术学专业论文
物流专业论文
人力资源专业论文
生物工程专业论文
市场营销专业论文
土木工程专业论文
化学工程专业论文
文化产业管理论文
工商管理专业论文
护理专业论文
数学教育专业论文
数学与应用数学专业
心理学专业论文
信息管理专业论文
工程管理专业论文
工业工程专业论文
制药工程专业论文
电子机电信息论文
现代教育技术专业
新闻专业论文
热能与动力设计论文
教育管理专业论文
日语专业论文
德语专业论文
轻化工程专业论文
社会工作专业论文
乡镇企业管理
给水排水专业
服装设计专业论文
电视制片管理专业
旅游管理专业论文
物业管理专业论文
信息管理专业论文
包装工程专业论文
印刷工程专业论文
动画专业论文
营销专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文范文
法律专业论文范文
教育管理论文范文
小学教育论文范文
学前教育论文范文
财务会计论文范文

电子商务论文范文

上一篇：英语动词名词化的转喻机制研究

下一篇：利血康软胶囊的制备与质量标准的..