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乳腺癌阅读框架内噬菌体文库的构建

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毕业论文范文题目：乳腺癌阅读框架内噬菌体文库的构建，论文范文关键词：乳腺癌阅读框架内噬菌体文库的构建
乳腺癌阅读框架内噬菌体文库的构建毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目前,癌症依然是当今世界的难题,全世界发病率最高的癌症是肺癌,其次是乳腺癌,随着生态环境的恶化和生活节奏的加快,癌症在人群中的发病率逐年增高,每年大约新增100万癌症患者,而早期诊断和早期治疗已经被医学界认为是解决癌症最有效的方法。肿瘤标志物是反映肿瘤存在和生长的一类物质,通过肿瘤（此处忽略..）标志物相关参数的变化可以获得大量的肿瘤生长信息,也为早期癌症诊断提供了依据.噬菌体表面展示技术在癌症肿瘤标志物的筛选中得到广泛应用,用pKE-2质粒经卡那抗性筛选富集开放阅读框架(open-readingframeORF)内阳性克隆,构建阅读框架内乳腺癌噬菌体表面展示文库可以提高筛（本文此处忽略..）选效率。方法：用Trizol试剂提取乳腺癌组织总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ和HindⅢ接头,用EcoRⅠ和HindⅢ消化接头,使形成两端分别带有EcoRⅠ和HindⅢ粘性末端的双链cDNA,将其连接于带有EcoRⅠ（此处忽略..）和HindⅢ末端的pKE-2质粒载体,转化大肠杆菌DH5a,经卡那抗性筛选,富集ORF克隆.回收ORF内双链cDNA片段,将其连接于带有EcoRⅠ和HindⅢ粘性末端的T7Select10-3b载体,经体外包装后,以BLT5615为受体菌构建T7噬菌体展示文库。结果：经过ORF筛选,文库中ORF克（略..）隆比例达到80%,较筛选前的5%提高75%。经测定,文库滴度为2.85×105pfu／mL,重组率为99%,扩增后文库滴度为2.65×109pfu／mL。对随机挑取的50个噬菌斑进行PCR鉴定,大部分插入片段在0.25-1kb之间。

以上为本篇毕业论文范文乳腺癌阅读框架内噬菌体文库的构建的介绍部分。

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