自体肿瘤特异性CTL对裸鼠乳腺癌模型抑瘤作用的研究

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自体肿瘤特异性CTL对裸鼠乳腺癌模型抑瘤作用的研究

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毕业论文范文题目：自体肿瘤特异性CTL对裸鼠乳腺癌模型抑瘤作用的研究，论文范文关键词：自体肿瘤特异性CTL对裸鼠乳腺癌模型抑瘤作用的研究
自体肿瘤特异性CTL对裸鼠乳腺癌模型抑瘤作用的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目标:树突状细胞(dendriticcell,DC)是人体内功能最强的抗原递呈细胞(antigenprocessingcell,APC)。在捕获肿瘤细胞后,DC迁徙到淋巴结中将肿瘤抗原提呈给T淋巴细胞,引诱其成为肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocyte,CTL),后者特异性杀伤肿瘤细胞。肿瘤引流淋巴结(tumor-draininglymphnode,TDLN)是位于肿瘤淋巴引流区的淋巴结,TDLN中含有丰富的淋巴细胞跟单核细胞。本实验采取体外引诱培养乳腺癌患者引流区淋巴结细胞,经负载肿瘤抗原的DC激活后,使之成为肿瘤特异性CTL,并回输同体乳腺癌裸鼠模型中,研究自体肿瘤特异性CTL在裸鼠体内对肿瘤细胞的成长克制跟杀伤作用。方法:手术时无菌摘除乳腺癌引流区肉眼断定无转移淋巴结2~3枚及瘤组织一块,同时无菌切取另一患者瘤组织一块,用机械法获取淋巴细胞悬液,离心,以rhG（略..）M-CSF、rhIL-4、rhIL-2跟TNF-α引诱培养,按期察看细胞状况学变更,收集部分细胞进行流式细胞术(flowcytometry,FCM)分析,使之成为DC跟肿瘤区域引流淋巴细胞(tumor-draininglymphnodecell,TDLNC),而后用自体乳腺癌冻融抗原刺激DC,并跟TDLNC共培养,以引诱产生肿瘤抗原特异性CTL;同时将切取的患者乳腺癌组织剪成约1mm3大小种植于32只3~4周龄BALB/C裸鼠胸垫部皮下建成裸鼠乳腺癌模型,2周后将裸鼠随机分成共4组,每组8只。每5天打针一次,①特异性CTL组(每只裸鼠部分打针抗原特异性CTL5×106/ml0.2ml)②非特异性CTL组(每只裸鼠部分打针非特异性CTL5×106/ml0.2ml)③异体CTL组(种植另一患者乳腺癌组织,每只裸鼠部分打针非自体抗原特异性CTL5×106/ml0.2ml)④空白对比组(每只裸鼠部分打针生理盐水0.2ml),每5天用游标卡尺测量记录肿瘤长径(a)、短径(b),按体（此处忽略..）积(V)=πab2/6打算肿瘤体积,并打算肿瘤成长克制率,统计分析移植瘤成长克制情况。30天后处死裸鼠取出瘤块。将肿瘤组织放入福尔马林溶液中固定、脱水、石蜡包埋切片。惯例HE染色,镜下察看肿瘤细胞状况;由病理医师诊断核实,免疫组化染色,察看T淋巴细胞跟树突状细胞浸润情况。成果:1淋巴结单个核细胞经体外培养后,贴壁细胞在引诱前,DC的特异性名义标记物CD1a、CD83、CD86的百分比分辨为10.98±2.38、26.55±5.24跟32.96±6.09,经与rhGM-CSF、rhIL-4独特培养,并经自体肿瘤冻融抗原加TNF-α引诱后三种标记物的程度明显升高,分辨为50.17±5.68、60.48±16.46跟56.22±16.38,P0.01;2TDLNC中CD3+跟CD8+细胞含量分辨为73.93±2.18跟32.78±3.21;经DC跟肿瘤抗原引诱后,DC-Ag-TDLNC中的CD3+跟CD8+细胞含量明显升高,分辨为82.67±2.79跟62.54±2.51,P0.01;DC-TDLNC组分辨为81.97±2.12跟60.59±2.55,P0.01;3人乳腺癌裸鼠移植瘤成活率为100%;4各医治组对肿（此处忽略..）瘤的成长都有克制造用,从第15天到第30天,空白对比组与各医治组移植瘤体积都有明显性差别。移植瘤成长克制以自体特异性CTL组最高,医治15天后肿瘤体积均匀达82.70±2.09mm3,小于非特异性CTL组(96.15±5.35mm3)跟异体CTL组(96.93±4.51mm3),差别有明显性(P=0.000);自体特异性CTL组抑瘤率(47.62%)明显高于非特异性CTL组(30.44%)跟异体CTL组(24.69%)抑瘤率,差别有明显性(P=0.000);5移植瘤标本HE染色镜下证明为乳腺浸润性导管癌,医治组瘤组织可见大量淋巴细胞浸润;医治组标本免疫组化可见被染成棕黄色树突状细胞跟大量淋巴细胞浸润于瘤组织中。论断:1乳腺癌患者腋下引流淋巴结细胞在rhGM-CSF、rhIL-4跟TNF-α的引诱下,可能分化为典范的DC;2DC存在较强的抗原提呈功能,可能促进TDLNC增殖、分化为抗原特异性CTL;3自体特异性CTL对裸鼠体内自体移植瘤有较高的克制造用,为乳腺癌免疫医治提供了实际根据;4病理证明移植瘤与人乳腺癌相符,且有（本文此处忽略..）DC跟大量淋巴细胞浸润;5该方法树破乳腺癌裸鼠模型成功率高,可保持人乳腺癌生物学特点,为研究乳腺癌提供了重要工具。总之,本实验采取直接体外培养TDLNC的方法,得到大量对自体肿瘤有很强杀伤作用的CTL,并成功在裸鼠体内克制自体移植瘤成长,对临床上乳腺癌细胞免疫医治提供了实际根据。

以上为本篇毕业论文范文自体肿瘤特异性CTL对裸鼠乳腺癌模型抑瘤作用的研究的介绍部分。

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