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绵羊同种及绵羊—山羊异种核移植研究

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毕业论文范文题目:绵羊同种及绵羊—山羊异种核移植研究,论文范文关键词:绵羊同种及绵羊—山羊异种核移植研究
绵羊同种及绵羊—山羊异种核移植研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:在绵羊同种及绵羊-山羊异种克隆胚构建过程中,为了完善克隆胚构建及培养体系,就离子霉素和乙醇分别联合6-D的激活、不同的融合和化学激活前培养时间和不同阶段添加饲养层对克隆胚发育的影响三个方面进行了研究。对绵羊同种核移植所得流产胎儿进行了分子生物学检测,结果表明:1.5mmol/L离子霉素联合6-D激活同种克隆胚胎和异种克隆胚胎5min,其卵裂率、桑椹胚和囊胚发育率虽均高于7%乙醇联合6-D激活胚胎5min(同种依次为79.67%Vs73.39%、44.79%Vs35.08%以及11.97%Vs8.18%,异种依次为76.00%Vs72.13%、36.84%Vs35.60%以及9.77%Vs6.82%),但差异不显著(P0.05),同种克隆和异种克隆胚胎比较,差异不显著(P0.05)。表明易(文章此处忽略..)得到的乙醇可以替代离子霉素。2.融合前平衡1h的同种和异种胚胎卵裂率,桑椹胚率均比不平衡直接融合明显高(同种76.88%,76.70%Vs64.49%,63.16%;52.85%,43.04%Vs33.33%,28.33%;异种为76.09%,77.53%Vs70.09%,63.33%;46.07%,44.93%Vs30.67%,28.07%)(P0.05),但平衡1h与直接融合囊胚发育率差异不显著。激活前平衡2h与否直接影响激活胚胎的完整率。融合后平衡2h再激活,可以获得明显高于直接激活的胚胎完整率(同种95.81%,97.27%Vs74.64%,69.85%;异种97.50%,96.40%Vs78.76%,67.16%)。总的看来,融合和激活前分别平衡1h,2h的同种及异种克隆胚胎均获得效果较好的胚胎激活完整率,分裂率,桑椹胚发育率和囊发育率(同种95.81%,76.88%,52.85%,9.76%;异种为:97.50%,76.09%,46.07%,10.11%)。但无论平衡与(略..)否,胚胎的融合率都没有显著差异。3.在克隆胚培养前72小时添加饲养层有助于提高卵裂率(同种差异显著,84.08%vs72.96%vs75.76%(P0.05);异种差异不显著,76.86%vs69.38%vs67.11%(P0.05)),同种克隆和异种克隆胚比较,异种克隆胚的卵裂率和囊胚率明显低于同种克隆胚胎。而在72h之后添加饲养层共培养,桑椹胚和囊胚发育率与未添加的差异均不显著(P0.05)(桑椹胚率同种31.47%vs40.0%vs51.48%;异种,37.84%vs39.22%vs51.48%,囊胚率同种,7.69%vs10.67%vs14.79%;异种,3.60%vs5.88%vs7.32%)。结果表明对同种和异种克隆胚胎而言,在前72h进行共培养,有利于胚胎的发育,而72h之后不需要饲养层共培养即可,同种克隆和异种克隆胚胎比较,差异不显著(P0.05)。(此处忽略..)4.筛选5对微卫星引物对体细胞克隆绵羊流产胎儿DNA进行PCR扩增,12%聚丙烯凝胶电泳,硝酸银染色克隆胎儿的微卫星DNA指纹与供体细胞完全相同,而不同于其受体母亲和对照绵羊。证明该流产羔羊基因来源于供体细胞,为体细胞克隆绵羊。用Sry基因特异性引物扩增发现流产胎儿和供核细胞一样均为雄性,进一步证实了该流产胎儿为体细胞克隆绵羊。


以上为本篇毕业论文范文绵羊同种及绵羊—山羊异种核移植研究的介绍部分。
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