比利时、新西兰、美国进境马铃薯有害生物风险分析及RT-PCR病毒检

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比利时、新西兰、美国进境马铃薯有害生物风险分析及RT-PCR病毒检

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比利时、新西兰、美国进境马铃薯有害生物风险分析及RT-PCR病毒检毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：马铃薯的经济价值在世界作物中占第四位,我国种植面积和产量都居世界第一位,但其品质和单产水平却是远远落后于其他马铃薯生产先进的国家。我国急需从马铃薯生产先进国家引进优质的马铃薯种薯来提高我国马铃薯的产量和品质。按照国际惯例,从境外引种前必须进行有害生物风险分析,保护我国农业生产、生态安全。本研究通过有害生物分类、风险评估和风险管理三个阶段的有害生物风险分析对从比利时、新西兰、美国引种马铃薯种薯进行了合理的风险预测,确立了科学有效的风险管理措施,将引种风险降到最低。进境马铃薯种薯（本文此处忽略..）有害生物风险分析的结果表明,进境比利时马铃薯种薯风险来自于以下几类有害生物:昆虫类(10种)、线虫类(8种)、腹足动物(2种)、真菌类(4种)、细菌类(1种)、病毒类(6种)、杂草类(5种);进境新西兰马铃薯种薯风险来自于以下几类有害生物:昆虫类(6种)、螨类(1种)、线虫类(5种)、腹足动物(1种)、真菌类(8种)、细菌类(2种)、病毒类(3种)、杂草类(12种);进境美国马铃薯种薯风险来自于以下几类有害生物:昆虫类(28种)、螨类(1种)、线虫类(9种)、腹足动物(1种)、真菌类(9种)、细菌类(7种)、病毒类(6种)、杂草类(13种)。此外,马铃薯病毒病是马铃薯生产中的重要制约因素,脱毒种薯的推广是控制马铃薯病毒（文章此处忽略..）的主要方法。优良种薯生产要求建立快速、准确、灵敏的病毒检测方法。本研究依据马铃薯X病毒、马铃薯Y病毒、马铃薯S病毒、马铃薯A病毒以及马铃薯卷叶病毒的基因组RNA保守序列设计特异性引物对,采用一步法和两步法RT-PCR对5种病毒进行了同步扩增,扩增片段大小分别为620bp(PVX)、550bp(PVY)、435bp(PVS)、300bp(PVA)和222bp(PLRV),经回收测序后表明PYX、PVY、PVS、PVA和PLRV的RT-PCR扩增靶带的序列完全正确。在此基础上,做了两步法RT-PCR检侧体系优化:试验从反转录、PC（本文此处忽略..）R等方面优化了两步法单重、二重和多重RT-PCR反应体系。结果表明反转录反应中dNTPs浓度、病毒下游引物浓度比例、PCR反应的退火温度以及Mg~(2+)浓度对RT-PCR体系检测马铃薯病毒有较大的影响。利用优化的多重RT-PCR反应体系可以同步检测马、铃薯多种病毒。同时,研究了一步法RT—PCR检侧体系优化:试验优化了一步法RT-PCR反应体系,在反应中不需要使用RNA酶抑制,且缩短了反应时间;一步法RT-PCR与两步法RT-PCR检测病毒RNA稀释梯度比较两种方法的灵敏度。利用（文章此处忽略..）优化的反应条件,一步法RT-PCR可以同步检侧马铃薯多种病毒,但是灵敏度较两步法RT-PCR略低。初步建立了同步检测多种马铃薯病毒的多重反转录聚合酶链式反应(M-RT-PCR)检测体系,为引种马铃薯质量的鉴定和脱毒种薯的生产提供快速、准确、灵敏、规范的病毒检测技术。

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