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编码RANK-Fc的质粒流体力学法转染对小鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

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毕业论文范文题目:编码RANK-Fc的质粒流体力学法转染对小鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用,论文范文关键词:编码RANK-Fc的质粒流体力学法转染对小鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用
编码RANK-Fc的质粒流体力学法转染对小鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目的:肝缺血再灌注损伤在移植外科中起着非常重要的作用,本实验旨在探讨RANK-Fc蛋白对小鼠肝缺血再灌注损伤保护的作用及可能的相关机制。方法:90只雄性BALB/c小鼠据不同处理随机分为如下三组:PBS假手术组(Shamgroup);15μgpLNCX2-IRES-eGFP+I/R转基因组(IRES为内核糖体载入位点,eGFP为增强绿色荧光蛋白)(Negative-control组);15μgpLNCX2-RANK-Fc-IRES-eGF(文章此处忽略..)P+I/R转基因组(RANK-Fc组),所有小鼠均采用PBS溶液2.5ml(含或不含质粒)经尾静脉6s内注射。3天后RANK-Fc及Negative-control组通过部分阻断左中叶肝脏建立70%缺血再灌注损伤模型,热缺血90min后再灌注不同时间,Sham组麻醉和剖腹后关腹不阻断肝门;各组再灌注0.5h、1h、3h、6h、12h及24h各剖杀小鼠5只,留取血清及肝组织标本。HE染色组织学变化及肝脏酶学水平测定用于判断肝损伤程度,酶联免疫吸附测定法定量测(略..)定肝组织匀浆促炎症介质TNF-α、IL-6及IL-1β水平。Western-Blot检测RANK-Fc,p-c-Jun、JNK、HIF-1α、caspase-3、胞核NF-κBp65、总NF-κBp65表达水平,RT-PCR法检测eGFPmRNA表达。免疫组织化学方法测定肝组织细胞核中NF-κB活化程度。TUNEL法用于检测细胞凋亡水平。结果:应用流体力学体内转染方法,RANK-Fc和eGFP在肝脏成功表达;相同时间点RANK(略..)-Fc组肝脏酶学水平均较Negative-control改善,差异具有统计学意义(P0.01);相较于Negative-control组,胞核NF-κBp65、JNK、HIF-1α及caspase-3活化均降低,差异均具有统计学意义(P0.01);相较于Negative-control组,RANK-Fc有效抑制促炎症介质TNF-α、IL-6及IL-1β释放,差异均具有统计学意义(P0.01),HE染色组织学改变减轻,免疫组化阳性染色细胞减少;相比于Ne(文章此处忽略..)gative-control组,RANK-Fc组细胞凋亡及caspase-3活化均降低,差异均具有统计学意义(P0.01)。结论:RANK-Fc对小鼠肝缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制至少部分通过阻断NF-κB介导的促炎症反应及JNK和HIF-1α介导的凋亡反应而实现。


以上为本篇毕业论文范文编码RANK-Fc的质粒流体力学法转染对小鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用的介绍部分。
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