农杆菌介导的紫花苜蓿BADH基因高效转化体系的优化跟转基因植株的

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农杆菌介导的紫花苜蓿BADH基因高效转化体系的优化跟转基因植株的

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农杆菌介导的紫花苜蓿BADH基因高效转化体系的优化跟转基因植株的毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：泥土盐渍化是一个世界性问题，是影响农业出产跟生态环境的一个非常重要的非生物胁迫因素。如何利用大面积的盐碱地，进步作物耐盐性是生物科学的一个重要研究课题。苜蓿是一种被誉为“牧草之王”的多年生优质豆科牧草，它不仅养分价值高，适口性好，适应性强、抗寒耐旱，是全世界广为种植的精良牧草，而且对生态环境管理、固土护坡、避免水土消散起到非常重要的作用。如何进一步进步其（文章此处忽略..）耐盐抗旱特点，扩大其种植范畴，是当前苜蓿出产面临的重要研究课题，基因工程的发展跟利用为苜蓿抗盐育种开辟了一条新的道路。本实验是苜蓿抗盐碱育种研究课题的一部分，是在已树破的苜蓿高频组培再生体系的基本上，进行了农杆菌介导的甜菜碱醛脱氢酶基因转化的进一步研究。重要成果如下：1.优化了农杆菌介导的苜蓿高效遗传转化体系。本实验在已有工作的基本上，对转化体系各因子进行（此处忽略..）了优化，断定了Cef最适浓度为400mg/L，Kan最适浓度为50mg/L；以GUS阳性产生率跟抗性愈伤组织率为转化指标探讨了不同苜蓿基因型、不同外植体类型跟外植体的不同生理状况对转化效力的影响，并选取转化效力高的基因型作为重要受体，侵染15天左右的叶片；在其它因子前提的优化中，合适的菌液浓度OD600值为0.3-0.5，侵染时光15-20分钟，无预培养，共培养3-4天，在农杆菌液体培养基及共（略..）培养基中都参加乙酰丁香酮（10mg/L）的处理方法比较好，侵染效力比较高。2.转化植株的PCR检测。转化研究中获得了大量Kan抗性愈伤组织，愈伤组织分化出再生植株后，提取其DNA进行PCR扩增反应，以PCR-Southern断定扩增出来的条带为特异性条带，在145个检测株系中，共获得34个呈阳性反应的株系。成果表明BADH基因已成功的转入苜蓿基因组中。3.转基因植株的耐盐（略..）性实验。组培前提下的抗盐梯度实验表明：未转基因植株在盐浓度达到0.7%时就结束成长，超过0.9%植株大部分已白化逝世亡，而转基因植株在盐浓度0.7-0.9%时基本能畸形成长，在1.2%盐害胁迫时呈现明显受害症状，表示为植株结束成长跟叶片白化。由此阐明BADH基因在转化植株中得到了良好表白。

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