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长白山林蛙输卵管分泌细胞培养产物中糖蛋白的提取及特点研究

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毕业论文范文题目:长白山林蛙输卵管分泌细胞培养产物中糖蛋白的提取及特点研究,论文范文关键词:长白山林蛙输卵管分泌细胞培养产物中糖蛋白的提取及特点研究
长白山林蛙输卵管分泌细胞培养产物中糖蛋白的提取及特点研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:长白山林蛙(RanachensinensisChangbaishanensis)重要分布于我国东北长白山跟小兴安岭地区,属于中国林蛙的一个亚种,有侧重要的药用价值及滋补保健功能。其雌性动物输卵管排卵前的干品俗称林蛙油(蛤蟆油),是继人参、鹿茸之后的又一开发利用的滋补保健品,存在补肾益精,润肺养阴之功能。输卵管糖蛋白是由输卵管上皮细胞合成跟分泌的一类特异性蛋白质,参加构成输卵管微环境,对配子受精前成熟、受精以及早期胚胎发育有重要的生殖生理作用(本文此处忽略..),并不同程度川受体内多种激素调控。但对于长白山林蛙输卵管分泌细胞培养产物中糖蛋白的提取分别未见报道。本研究对长白山林蛙输卵管分泌细胞进行体外培养。用饱跟度不同的硫酸铵分级盐析输卵管分泌细胞培养液的上清液,将培养液中的蛋白分别出后,用电泳的方法测定其为糖蛋白,最后用DEAECellulose-52阴离子交换柱层析及SephadexG-100分子筛层析对分别出的糖蛋白进行纯化研究,得到糖蛋白的纯品,对其生物学特点进行研究,从而可能保护野生林蛙资源(此处忽略..),在促进生态均衡,实现野生林蛙资源的可持续利用等方面都存在重要意思,同时也为人工出产林蛙油跟生物制药提供坚固的实验根据。本论文重要研究内容及成果如下:1.长白山林蛙输卵管分泌细胞的培养采取剪切、撕碎法处理长白山林蛙输卵管组织。离心除去输卵管组织,收集其上清液放入包被好的培养瓶中在37℃培养箱中进行培养。当细胞长满培养瓶时,进一步扩大培养,收集其扩大培养后的细胞液。2.长白山林蛙输卵管分泌细胞培养产物中糖蛋白的分别纯化实验断定长白山林蛙输卵分(本文此处忽略..)泌细胞培养产物中糖蛋白盐析的最适硫酸铵饱跟度为70%,此时生成的蛋白积淀最多为0.3mg/100mg,收集盐析后积淀离心,取其上清液,经SDS-PAGE电泳,断定其存在蛋白且分子量为116KDa,与长白山林蛙输卵管组织内腔冲刷液所含糖蛋白雷同。采取等电聚焦电泳的方法测定糖蛋白的等电点(pI)成果为:p工为pH=5.2。而后采取DEAECellulose-52阴离子交换柱层析及SephadexG-100分子筛层析对分别出的糖蛋白进行纯化,最后经SDS-PAGE电泳鉴定糖蛋白(本文此处忽略..)的纯度,且分子量为116KD。3.长白山林蛙输卵管分泌细胞培养产物中糖蛋白的定性分析成果(1)紫外全扫描:纯化后的样品在200nm-900nm波长范畴进行紫外全扫描得出200m处有多糖特点峰,在280nm处有蛋白接收峰,因此可能定性输卵管分泌细胞培养液中含糖蛋白;(2)红外全扫描:在4000-400cm-1范畴内进行红外全扫描定性输卵管分泌细胞培养液中含糖蛋白。


以上为本篇毕业论文范文长白山林蛙输卵管分泌细胞培养产物中糖蛋白的提取及特点研究的介绍部分。
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