犬渺小病毒JL09-11株的分别鉴定及免疫研究

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犬渺小病毒JL09-11株的分别鉴定及免疫研究

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毕业论文范文题目：犬渺小病毒JL09-11株的分别鉴定及免疫研究，论文范文关键词：犬渺小病毒JL09-11株的分别鉴定及免疫研究
犬渺小病毒JL09-11株的分别鉴定及免疫研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：犬渺小病毒病是一种感染犬跟野生犬科动物的急性接触性感染病,对我国乃至世界的养犬业造成了较大的迫害,因此,在初生幼犬的免疫程序中,犬渺小病毒病的免疫是必不可少的。同时,犬渺小病毒是一种变异性极强的病毒,自从1978年CPV-2被成功分别以来,人们已经发明了数种变异变种,包含CPV-2a,CPV-2b,跟CPV-2c等。这些变种重要是因为犬渺小病毒粒子名义重要抗原位点上的氨基酸序列产生变异造成的。这些位点上的氨基酸变异使得病毒存在了不同的抗原性,这种抗原性上的差别可能用单克隆抗体进行辨别。固然人们已经证切实大多数情况下,犬渺小病毒的不同变种毒株之间存在完全的免疫保护力,然而因为疫苗株病毒与风行毒株抗原性的差别而造成免疫失败的案例也时有报道。因此,对本病进行防控的重要任务就是跟踪病毒的风行变异趋势,研制针对正在风行的病毒株的疫苗,免得因为新型病毒的呈现或异种抗原类型毒株的侵入而有可能造成的大范围风行,对家犬或野生犬科动物造成较重大的迫害。本（本文此处忽略..）研究取吉林省境内一只疑似患有犬渺小病毒病的病犬肠内容物作为病料,对其进行PCR检测,成果为阳性。之后将病料研磨,过滤后接种F81细胞系进行犬渺小病毒的分别。在接种4天后,细胞呈现了犬渺小病毒特异性的病变,同时畸形细胞对比未产生类似的细胞病变。将病变的细胞上清冻融三次收毒后在F81细胞系上持续传代,持续传代三次后病变仍然牢固。咱们分辨用PCR方法,血凝跟血凝克制实验对细胞培养物中的犬渺小病毒进行检测,成果均为阳性。其中在利用PCR的方法进行检测的过程中,咱们采取的是肉食类动物犬渺小病毒的通用引物,成果呈现了目标条带;血凝实验的成果显示细胞培养物中犬渺小病毒的血凝效价为212为了对所分别的犬渺小病毒毒株进前进化分析跟氨基酸序列分析,咱们首先用有限稀释法对病毒进行了纯化,将纯化后的病毒作为模板,对其重要抗原基因VP2进行扩增,并测序。成果发明咱们分别到的犬渺小病毒是一株存在新型抗原特点的犬渺小病毒,这表示在其VP2基因的重要抗原位点上的氨基酸序（此处忽略..）列较以前分别得到的任何一个变种都不完全一致。咱们收集在NCBI数据库中存在的国内犬渺小病毒分别株的VP2基因序列,与JL09-11株一并进行了进化分析,成果发明JL09-11株在进化树中与国内的CPV-2a变种存在较近的进化关联。然而在对本株CPV进行氨基酸序列分析的过程中,咱们发明它并不能被归为CPV-2a这一变种,;血凝克制实验的成果表明,细胞培养物的血凝作用可能被本实验室保存的抗犬渺小病毒的阳性血清所克制。至此咱们断定已经分别得到犬渺小病毒,并将其命名为JL09-11株。起因是其297位氨基酸与CPV-2b变种雷同,是A而不是S,对国内分别到的各个CPV毒株进前进一步的分析发明,国内所分别到的大多数被定义为CPV-2a变种的毒株其297位氨基酸是A而非S。同S297A变种比较又有555位氨基酸的差别,咱们认为我国风行的大多数CPV毒株存在这样的特点,它们是介于CPV-2跟CPV-2c之间的进化变种。因此以存在本国CPV抗原特点的CPV毒株为毒种,研制灭活疫苗,对我国犬渺小病（略..）毒病的风行存在很好的针对性。咱们将JL09-11株犬渺小病毒灭活后辅以本实验室配制的纳米佐剂对其免疫后果进行了评估,为JL09-11株毒种灭活疫苗的研制奠定基本。在进行JL09-11株犬渺小病毒进行免疫后果评估之前,咱们首先在F81细胞系上树破了中跟实验,用以测定血清中犬渺小病毒的中跟抗体。为当前灭活疫苗的免疫后果评估做筹备。将JL09-11株犬渺小病毒的细胞培养悬液于37℃利用1%的甲醛灭活24小时后,对其进行TCID50咱们采取未接种任何疫苗,且外周血中犬渺小病毒中跟抗体滴度较低的健康家犬来对咱们灭活犬渺小病毒JL09-11株的免疫后果进行评估。在免疫实验过程中,每条实验犬打针灭活疫苗的剂量为1.5ml,其中含有大概5.0×10的测定,成果显示病毒已经完全被灭活。而后以4:1的比例与本实验室制备的纳米佐剂进行混淆后制成犬渺小病毒的灭活疫苗。5个TCID50通过本研究咱们分别到了一株新的犬渺小病毒,进化分析显示,本株犬渺小病毒与国内的CPV-2a变种存在较近的进化关联。并且咱们发明,国内的大多数被归（文章此处忽略..）为CPV-2a变种的毒株与JL09-11一样,重要抗原蛋白VP2的第297位氨基酸均为A,同时其555位氨基酸产生了由I到V的回复渐变。这与CPV-2b跟CPV-2c雷同。咱们发明国内风行的重要就是带有这两个渐变的CPV-2a变种。咱们利用本研究所分别到的JL09-11株犬渺小病毒进行了灭活跟免疫实验,成果证明,咱们分别到的JL09-11株犬渺小病毒存在较好的免疫原性,存在用于研制灭活疫苗的利用潜力。经过灭活的犬渺小病毒。在免疫前以及免疫后14天,分辨对实验犬外周血中的犬渺小病毒中跟抗体滴度进行测定。成果显示,在免疫后14天实验犬外周血中的犬渺小病毒中跟抗体较免疫前得到了明显进步。证明了本研究所分别得到的犬渺小病毒存在研制灭活疫苗的潜力。

以上为本篇毕业论文范文犬渺小病毒JL09-11株的分别鉴定及免疫研究的介绍部分。

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