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麦冬(Ophiopogon japonicus)甜菜碱合成酶基因的克隆与表白研究

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毕业论文范文题目:麦冬(Ophiopogon japonicus)甜菜碱合成酶基因的克隆与表白研究,论文范文关键词:麦冬(Ophiopogon japonicus)甜菜碱合成酶基因的克隆与表白研究
麦冬(Ophiopogon japonicus)甜菜碱合成酶基因的克隆与表白研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:甘氨酸甜菜碱(glycinebetaine,简称甜菜碱)是在细菌、动物、动物等生物体中起着无毒浸透保护作用的最重要的浸透调节剂。本文选用适应性强,存在极强的抗胁迫才能,在我国大部分地区均有野生分布跟栽培的百合科沿阶草属多年生常绿木本荫生动物麦冬(Ophiopogonjaponicus(L.F)Ker-Gawl)作为材料,对其甜菜碱合成酶基因进行了相干的研究。重要成果如下:(此处忽略..)1、对已在GenBank上发布的甜菜碱合成酶关键基因BADH跟CMO进行检索跟序列比对,设计简并引物,采取RT-PCR跟RACE技巧获得了麦冬BADH跟CMO的cDNA全序列,GenBank注册号分辨为DQ645888跟DQ645889。2、获得的麦冬BADH全长1785个核苷酸,5’端非编码区有63个核苷酸,3’端非编码区有219个核苷酸,开放浏览框1503个核苷酸,编码一个由500个氨基酸组成的多肽。进行BLAST同源(本文此处忽略..)性比对,发明麦冬与藜科动物的BADH部分序列同源性较高。将BADH的编码区揣测的氨基酸在GenBank中进行分析,能找到磷酸果糖激酶、乙醛脱氢酶家族,谷胺酰磷酸还原酶等的保守区域。3、获得的麦冬CMO全长1602个核苷酸,5’端非编码区有54个核苷酸,3’端非编码区有231个核苷酸,开放浏览框1317个核苷酸,编码一个由438个氨基酸组成的多肽。进行BLAST同源性比对,麦冬与藜科部分动物CMO部(略..)分序列同源性较高。将CMO的编码区揣测的氨基酸在GenBank中进行分析,能找到丙酸盐加氧酶、环羟基加氧酶的保守区域以及多铁原子核结合域、铁硫原子结合区等。4、设计带特定酶切位点的特异引物,分辨克隆了麦冬BADH跟CMO的编码区片段,构建了动物表白载体pCU1303-BADH跟pCU1303-CMO。5、Northen杂交检测表明麦冬BADH跟CMO在NaCl浓度处理下的表白量明(略..)显高于对比,随时光的延长BADH跟CMO基因在麦冬叶片中的表白量逐步增加;同时Northen杂交检测表明BADH跟CMO在低温胁迫处理下的表白量也明显高于对比,随时光的延长,BADH跟CMO基因在麦冬叶片中的表白量也逐步增加。


以上为本篇毕业论文范文麦冬(Ophiopogon japonicus)甜菜碱合成酶基因的克隆与表白研究的介绍部分。
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