狐貉源犬瘟热病毒分别株F基因序列分析及H、F、N基因结合免疫小鼠

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狐貉源犬瘟热病毒分别株F基因序列分析及H、F、N基因结合免疫小鼠

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狐貉源犬瘟热病毒分别株F基因序列分析及H、F、N基因结合免疫小鼠毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：犬瘟热(Caninedistemper,CD)是由犬瘟热病毒(Caninedistempervirus,CDV)引起的多种动物急性、高度接触性感染病,是毛皮动物人工养殖中常常产生的重要病毒性感染病之一,一旦风行,逝世亡率达30%～100%。这岂但给毛皮动物养殖场(户)造成了重大的经济丧失,且重大地影响跟制约全部产业的疾速发展。目前惯例弱毒疫苗的广泛利用,固然使CD得到了较好的防备跟把持,然而也存在诸多毛病。比方,弱毒苗多轻易受母源抗（本文此处忽略..）体的烦扰;可能有毒力返强的危险;弱毒苗对部分野活泼物也是不保险的;特别是近年来CDV的始终变异跟野毒株的呈现,使得弱毒苗不可能提供完全的保护。因此研究CDV的遗传变异法则,研制新一代保险、高效的CD基因工程疫苗,对犬瘟热的有效防控是存在极其重要的事实意思的。本研究从黑龙江地区豢养场发病狐、貉中分别获得6株犬瘟热病毒(CDV),分辨命名为MS01、SC01、ZD01、GN01、HL01、NM01分别株。根据Genbank上发表的的CDVF（本文此处忽略..）基因序列设计了1对特异性引物,利用RT-PCR方法分辨对6个分别株F基因进行克隆、测序,并推导其氨基酸序列,绘制出F基因的遗传进化树。成果表明:6个CDV分别株F基因的开放浏览框架(ORF)均为1989bp,编码663个氨基酸,蛋白构造中的13个Cys残基位点跟4个潜在的糖基化位点均高度保守,其裂解位点的氨基酸序列为~(220)R-R-Q-R-~(224)R。遗传进化分析表明:6个分别株与CDV代表强毒株A75/17属于同一谱系,均为强毒株。其中,HL01株与海豹瘟热病（文章此处忽略..）毒2型(PDV-2)亲缘关联较近,与其它5个分别株关联绝对较远。进一步抉择其中代表性较强的MS01分别株,将其全长F基因插入真核表白载体pcDNA3.1+,并通过酶切跟PCR技巧在DNA程度上对其进行鉴定,表明成功构建了pcDNA-F真核表白质粒。将所构建重组质粒pcDNA-F与实验室保存质粒pcDNA-H跟pcDNA-N结合免疫小鼠,成果表明:3个基因混淆免疫组其CD4~+T跟CD8~+T细胞的百分含量明显高于单基因跟双基因免疫（本文此处忽略..）组,濒临于弱毒疫苗组CD4~+T跟CD8~+T淋巴细胞的百分含量。血清中能检测出特异性抗CDV抗体。表明H、F、N基因的重组质粒DNA免疫小鼠可能引诱产生特异性细胞免疫跟相应的体液免疫。为下一步动物实验以及针对毛皮动物犬瘟热病毒感染的DNA疫苗的研制奠定了基本。

以上为本篇毕业论文范文狐貉源犬瘟热病毒分别株F基因序列分析及H、F、N基因结合免疫小鼠的介绍部分。

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