1、SiRNA抑制缺氧诱导因子-1α对食管鳞癌糖酵解及相关基因表达的

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1、SiRNA抑制缺氧诱导因子-1α对食管鳞癌糖酵解及相关基因表达的

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毕业论文范文题目：1、SiRNA抑制缺氧诱导因子-1α对食管鳞癌糖酵解及相关基因表达的，论文范文关键词：1、SiRNA抑制缺氧诱导因子-1α对食管鳞癌糖酵解及相关基因表达的
1、SiRNA抑制缺氧诱导因子-1α对食管鳞癌糖酵解及相关基因表达的毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景：食管癌是导致肿瘤相关性死亡的最常见病因之一，在我国主要为食管鳞癌，其发病率和死亡率均居世界前列。实体肿瘤生长迅速，其内部供血供氧相对不足，肿瘤中普遍存在局部缺氧的微环境。肿瘤细胞依赖糖酵解获得能量的特点是其缺氧耐受的代谢基础。缺氧诱导因子-1（hypoxiainduciblefactor-1，HIF-1）是机体适应缺氧微环境的关键调节因子，在食管鳞癌中高表达，并与肿瘤的浸润深度、淋巴结及远处器官转移密切相关。HIF-1α可能是调节肿瘤细胞糖酵解的重要蛋白，已成为肿瘤发病机制和治疗研究的热点。目的：利用RNA干扰技术特异性沉默人食管鳞癌细胞TE13和Eca-109中的HIF-1α，观察RNA干扰抑制HIF-1α对肿瘤细胞糖酵解相关基因表达的影响，探讨HIF-1α基因与食管癌细胞糖酵解通路之间的关系。方法：1．取人食管鳞癌细胞TE13及Eca109,分别常氧和缺氧培养，缺氧培养时间分别为6、12、24、48小时，采用Western印迹检测细胞中HIF-1α蛋白的表达变化，选择可以引起HIF-1α蛋白表达最高的时间点作为后续的缺氧培养时间。2．分别常氧和缺氧培养TE13及TE13/siHIF，实时定量PCR法检测糖酵解相关基因己糖激酶（HK-Ⅱ）、葡萄糖转运蛋白-1（Glut-1）、乳酸脱氢酶A(LDH-A)的mRNA表达。3.分别常氧和缺氧培养TE13及TE13/siHIF，Westernblot检测糖酵解相关基因己糖激酶（H（文章此处忽略..）K-Ⅱ）、葡萄糖转运蛋白-1（Glut-1）、乳酸脱氢酶A(LDH-A)的蛋白表达。4．分别常氧和缺氧培养Eca-109及Eca-109/siHIF，实时定量PCR法检测糖酵解相关基因己糖激酶（HK-Ⅱ）、葡萄糖转运蛋白-1（Glut-1）、乳酸脱氢酶A(LDH-A)的mRNA表达。5．分别常氧和缺氧培养Eca-109及Eca-109/siHIF，Westernblot检测糖酵解相关基因己糖激酶（HK-Ⅱ）、葡萄糖转运蛋白-1（Glut-1）、乳酸脱氢酶A(LDH-A)的蛋白表达。6．将TE13、TE13/siHIF和Eca-109、Eca-109/siHIF细胞分别在常氧和缺氧条件下培养适当的时间，以分光光度法检测各株细胞上清液中乳酸分泌情况，探讨HIF-1α与肿瘤细胞糖酵解的关系。结果：1．缺氧条件（1%O2浓度）下培养TE13及Eca109,设置不同缺氧时间（分别为6、12、24、48h），并以常氧培养（20%O2浓度）为对照，观察HIF-1α蛋白表达情况。Western印迹结果显示，缺氧条件（1%O2浓度）下，TE13及Eca109中HIF-1α表达均随厌氧时间延长而逐渐升高（P＜0.05），在缺氧12h表达达到高峰，后表达又随时间延长而下降。TE13及Eca109缺氧后HK-Ⅱ表达均较常氧培养明显增强（P＜0.05），尤以缺氧12h后增强明显。2．常氧条件下TE13/siHIF中的HIF-1αmRNA表达被显著抑制，缺氧后TE13/siHIF细胞中的HIF-1α表达无明显增强。常氧及缺氧条件下，HK-Ⅱ、GLUT-（本文此处忽略..）1、LDH-A的mRNA表达均随HIF-1α沉默而明显抑制，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。3.常氧条件下TE13/siHIF中的HIF-1α蛋白表达被显著抑制，缺氧后TE13/siHIF细胞中的HIF-1α表达无明显增强。常氧及缺氧条件下，HK-Ⅱ、GLUT-1的蛋白表达均随HIF-1α沉默而明显抑制，差异具有统计学意义（P＜0.05）,HIF-1α被干扰后，TE13中LDH-A蛋白表达稍减弱（P＞0.05）。4.常氧条件下Eca109/siHIF中的HIF-1αmRNA表达被显著抑制，缺氧后Eca109/siHIF细胞中的HIF-1α表达无明显增强。常氧及缺氧条件下，HK-Ⅱ、GLUT-1、LDH-A的mRNA表达均随HIF-1α沉默而明显抑制，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。5.常氧条件下Eca109/siHIF中的HIF-1α蛋白表达被显著抑制，缺氧后Eca109/siHIF细胞中的HIF-1α表达无明显增强。常氧及缺氧条件下，HK-Ⅱ、GLUT-1的蛋白表达均随HIF-1α沉默而明显抑制，差异具有统计学意义（P＜0.05）；HIF-1α被干扰后，Eca109中LDH-A蛋白表达稍减弱（P＞0.05）。6．TE13、Eca109细胞缺氧时乳酸分泌增多，HIF-1α沉默后乳酸分泌显著减少（P＜0.05），缺氧不能使HIF-1α沉默的细胞乳酸分泌增加（P＞0.05）。结论：1、HIF-1α蛋白表达与食管癌细胞缺氧时间密切相关，缺氧12小时HIF-1α蛋白表达达到高峰。2、沉默HIF-1α（本文此处忽略..）表达后，HK-Ⅱ、Glut-1、LDH-A的mRNA及蛋白表达均有所下调，表明HK-Ⅱ、Glut-1、LDH-A可能是HIF-1的靶基因。3、常氧及缺氧条件下，食管癌细胞中HIF-1α被抑制后，糖酵解产物乳酸分泌均显著减少，表明HIF-1α基因与食管癌细胞糖酵解通路密切相关，此途径可能涉及HKⅡ、GLUT1及LDHA的表达抑制。背景：碱式依卡倍特铋（BismuthylEcabet）是由磺化脱氢松香酸与氢氧化铋形成的复合盐。在日本，依卡倍特钠作为一较好的抗溃疡药物已经上市。本品在化学结构上比依卡倍特钠有很大改进，为胃粘膜保护剂，通过对胃粘膜的保护发挥疗效。动物试验及参考资料显示，本品在胃部仅少量解离，且表现出很好的治疗消化性溃疡及胃炎的效果，在临床上可能较其它磺化脱氢松香酸或铋剂疗效更佳。在本研究中，我们通过单次不同剂量给药及多次给药的方式评估碱式依卡倍特铋干混悬剂在中国健康人群中的安全性及耐受性，为该药的进一步临床研究提供依据。目的：研究健康受试者对依卡倍特铋的耐受程度及药物的安全性，为依卡倍特铋干混悬剂的Ⅱ、Ⅲ期临床研究给药方案的制定提供依据。方法：48名健康受试者被随机分为单剂量及多次给药组，其中单次给药耐受性试验共进行5个剂量组，分别为：200mg、400mg、800mg、1200mg、1600mg，单次口服给药。多次给药耐受性试验：共进行1个剂量组，给药剂量为1200mg/次，每日两次，连续给药7天，口服（略..）给药。通过体格检查、血清生化等检查等评估药物的安全性及健康受试者对药物的耐受性。结果：碱式依卡倍特铋干混悬剂的单剂量给药及多次给药组中均未出现严重不良事件，观察到的药物不良反应包括：单次给药耐受性试验中有2名受试者出现血γ-GGT升高，1名受试者出现血BUN升高，1名受试者出现ALT升高，判断为可能与药物相关。多次给药耐受性试验中有1名受试者出现转氨酶ALT、AST升高，判断可能与药物相关。所有血清学检查出现异常的健康受试者，在无任何医疗干预的情况下，7天后复查指标均完全恢复正常。结论：碱式依卡倍特铋干混悬剂在中国健康人群中表现出良好的耐受性和安全性，在Ⅱ、Ⅲ期临床给药方案中，应进一步观察碱式依卡倍特铋干混悬剂的受试者GGT、ALT、BUN，以及出现皮疹等指标和现象。

以上为本篇毕业论文范文1、SiRNA抑制缺氧诱导因子-1α对食管鳞癌糖酵解及相关基因表达的的介绍部分。

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