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脂肪肝体内外模型的建立及药物筛选

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毕业论文范文题目:脂肪肝体内外模型的建立及药物筛选,论文范文关键词:脂肪肝体内外模型的建立及药物筛选
脂肪肝体内外模型的建立及药物筛选毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:背景和目的脂肪肝是代谢综合症的表现,早期表现为单纯性脂肪变性,其后可能还会发生脂肪性肝炎,肝纤维化,肝硬化。它的高发病率越来越受到重视。积极研究开发治疗脂肪肝的高效、价廉、方便、安全的药物意义重大。本课题探讨建立脂肪肝体外模型和动物模型,观察姜黄素衍生物JZ2、SFR1和四氢姜黄素对体内外脂肪肝模型的保护作用。方法(1)采用油酸作用于肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞株L02的方法在体外建立脂肪肝细胞模型,并应用MTT法筛选姜黄素衍生物JZ2、SFR1及四氢姜黄素作用于肝细胞的非细胞毒浓浓度,以油红O染色,观察不同给药组非细胞毒浓度对细胞内脂滴形成情况,并检测细胞上清液的ALT、AST及γ-GT。从而观察药物在体外抗脂肪肝的作用效果。(2)通过给予高脂饲料、腹腔注射四环素的复合方式建立小鼠脂肪肝的模型,同时给予不同剂量的姜黄素衍生物JZ2、SFR1和四氢姜黄素固体分散剂,于(略..)实验第36天,取血及肝组织,计算肝指数、检测血脂及肝功:血清TG、CHO、LDL-C、HDL-C、ALT、AST,肝脏内脂质:肝匀浆TG、CHO;采用肝脏冰冻切片及油红0染色、病理切片等手段观察肝脏的病理变化。从而观察药物在小鼠体内抗脂肪肝的疗效。结果1.(1)通过MTT法筛选出姜黄素衍生物JZ2、SFR1的非细胞作用浓度为100ug/ml、200ug/ml、300ug/ml、400ug/ml,四氢姜黄素的非细胞作用浓度为10ug/ml、20ug/ml、30ug/ml;(2)油红O染色后,在光镜下观察发现80ug/ml油酸刺激HepG2细胞24小时后,模型组细胞内有大量的红色脂滴积聚,48小时后红色脂滴开始减少;60ug/ml油酸刺激L02细胞24小时后,模型组细胞内有大量的红色脂滴积聚,72小时后细胞红色脂滴开始减少。间隔24小时两次给药,药物作用于HepG2细胞48、72小时均未见脂滴减少;药物作用于L02细胞48小时未见脂滴减少;药物作用于L02细胞(略..)72小时随着作用浓度的增加细胞内的脂滴逐渐减少。(3)用ImageProPlus6.0图像分析软件分析药物对油酸刺激48h后L02细胞的油红O染色图片,各给药组与模型组比较,脂滴显著减少(P﹤0.05)。其中四氢姜黄素30ug/ml,JZ2300ug/ml,SFR1400ug/ml差异有极显著性区别(P﹤0.01)(4)检测细胞上清液中ALT、AST、γ-GT,表明四氢姜黄素对肝功能影响较小,JZ2、SFR1对肝功能均有一定影响。2.(1)通过给予高脂饲料、腹腔注射150mg/kg四环素的复合方式成功建立了小鼠脂肪肝的模型,与正常组相比,模型组小鼠的肝指数、血清TG、CHO、LDL-C、ALT、AST以及肝匀浆TG、CHO均显著升高(P0.05)。肝脏冰冻切片油红0染色、肝脏病理切片及HE染色也证实其发生了脂肪肝病变;(2)与模型组相比,四氢姜黄素固体分散剂对CHO、LDL-C、HDL-C有降低趋势,但在低剂量组作用更显著,部分数据有统计学意义(本文此处忽略..),对TG作用不明显。在肝指数、肝内脂质特别是TG、肝功ALT、AST方面都有下降作用,且有明显的剂量依赖关系。200mg/kg组、300mg/kg组对肝指数、肝内脂质(TG)、肝功ALT的改善具有统计学意义。冰冻切片油红0染色及病理切片也证明四氢姜黄素对小鼠脂肪肝的保护作用。(3)与模型组比较,姜黄素衍生物JZ2在高、低剂量组对血脂TG、CHO、LDL-C有不同程度的降低,部分数据有统计学意义,TG、HDL-C在低剂量组作用更好。SFR1高低剂量对血脂CHO、LDL-C不同程度的降低,部分数据有统计学意义,但对TG影响不理想。两药对小鼠的肝指数、肝脏内脂质无明显作用。冰冻切片油红0染色及病理切片与模型组比较没有明显区别。结论(1)建立了较稳定的脂肪肝体外筛药模型:油酸刺激L02细胞48小时,在油酸刺激前24小时药物给药一次,24小时后与油酸一起再给药一次,可以筛选出药物的体外抗脂肪肝作用。(2)建立(略..)了小鼠脂肪肝模型:高脂饲料、腹腔注射150mg/kg四环素。(3)姜黄素衍生物JZ2、SFR1与四氢姜黄素均具有一定干预脂肪肝体外模型的作用,有效减少细胞内脂滴的形成,四氢姜黄素四氢姜黄素对肝功影响较小,JZ2、SFR1对肝功影响均较大。(4)姜黄素衍生物JZ2、SFR1在1000mg/kg内对血脂有改善作用,但对脂肪肝没有保护作用。(5)四氢姜黄素固体分散剂对血脂有改善作用,但在低剂量100mg/kg作用更显著,对脂肪肝有保护作用。


以上为本篇毕业论文范文脂肪肝体内外模型的建立及药物筛选的介绍部分。
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