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蓝舌病毒BTV-HbC_3株与蓝舌病毒BTV-10型的比较研究

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毕业论文范文题目:蓝舌病毒BTV-HbC_3株与蓝舌病毒BTV-10型的比较研究,论文范文关键词:蓝舌病毒BTV-HbC_3株与蓝舌病毒BTV-10型的比较研究
蓝舌病毒BTV-HbC_3株与蓝舌病毒BTV-10型的比较研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:蓝舌病毒(BluetongueVirus,BTV)是呼肠孤病毒科环状病毒属的成员,由昆虫传播,感染牛、羊等野生反刍动物。该病毒全世界己发明25个血清型,给畜牧业造成了重大的经济丧失。BTV含10分子的双链RNA(dsRNA)作基因组,分辨编码病毒7个构造多肽(VP1,VP2,VP3,VP4,VP5,VP6,VP7)跟3个非构造蛋白多肽(NS1,NS2,NS3)。外衣壳由两种重要多肽VP2跟VP5构成,内衣壳重要由VP3跟VP7两种多肽构成,同时内衣壳包绕三种少量蛋白VP1、VP4跟VP6以及基因组。VP7蛋白携带有群特异性抗原决定簇,在病毒装配中起重要作用,占衣壳蛋白组成的36%。由该病毒群特异性抗原决定簇产生的抗体多数是针对VP7的,且S7基因非常保守,是BTV新型疫苗的重要研究对象。VP2蛋白是蓝舌病毒的重要构造多肽,含有型特异性抗原决定簇,引诱机体产生中跟抗体。蓝(略..)舌病毒BTV-HbC_3株是咱们实验室于1994年在襄樊某畜牧场合分别到的一株病毒。本研究通过对BTV-10型跟BTV-HbC_3的增殖特点、免疫学特点、状况学特点以及分子生物学方面的比较进一步证明了BTV-HbC_3是一株蓝舌病毒,并且可能是一株新的基因型毒株。1、蓝舌病毒BTV-HbC_3在Vero、MCF-7跟Hep-3B细胞上的增殖特点以及与BTV-10的免疫学关联。发明BTV-HbC_3株跟BTV-10株感染细胞后在48hr之内均呈现CPE,表示为细胞紧缩变圆、间隔变大等特点。通过琼脂糖双向扩散实验显示BTV-HbC_3跟BTV-10型编码独特抗原。2、根据已发表的BTV-10标准株S7基因序列,通过PrimerPremier5.0软件设计合成一对覆盖BTV-10S7片段13.303bp之间区段的引物,经逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出蓝舌病毒BTV-H(文章此处忽略..)bC_3株跟BTV-10型的S7基因5′非编码区(NonCodingRegion,NCR)cDNA片段,以树破起dsRNA体外扩增体系。将扩增的BTV-HbC_3毒株的S7基因5′非编码区片段通过粘端连接克隆到pUCm-T载体中,用PCR技巧跟限度性内切酶分析鉴定,表明获得重组质粒pUCm-T-BTV-HbC_3-S7。在ABIPRISM377全主动序列分析仪上测序得到蓝舌病毒BTV-HbC_3株跟BTV-10型S7片段5‘一NCR区域分辨长为277bp跟290bp的产物。通过Blast软件将两株病毒核昔酸序列在GenBank上比对发明,BTV一HbC3株57基因5‘非编码区与呼肠孤病毒一3(Reovirus一3)型LZ片段3464bp一3739bp序列雷同;然而就这一段序列比较而言,BTV一HbC3株跟BTV一10型之间并无同源。兴许BTV一HbC3跟BTV一10来源于两个基因群,或是在双(此处忽略..)链RNA病毒中RNA多聚酶缺乏严格的校订活性以及在进化过程中与呼肠孤病毒一3产生基因重配(reassortment)插入了一段呼肠孤病毒一3的序列使然。3、MTT法确证了BTV一HbC3株跟BTV一10型对乳腺癌细胞MCF一7有较强的抗增殖作用;将两株病毒分辨以1MOI接种MCF一7细胞,通过流式细胞术检测凋亡率分辨为31.9%跟29.1%。成果表明BTV一HbC3株跟BTV一10型体外可能杀乳腺癌MCF一7细胞。论断:通过病毒与细胞彼此作用的生物学特点、病毒分子生物学跟免疫学特点等进行体系研究,揭示出:BTV一HbC3与BTV一10可能感染肿瘤细胞,并且表示出基本相同的细胞生物学特点跟状况学特点;BTV一HbC3跟BTV一10型编码独特抗原,因为VP7是BTV的群特异性抗原,咱们认为二者的独特抗原为VP7;利用BTV一1057片段5‘非编码区13一3O3bp区段设计的一对特(文章此处忽略..)异性引物能有效地扩增合成BTV一HbC3277bp大小特异性片段,所扩增片段大小与BTV一10并不雷同;序列分析表明BTV一HbC3株s7基因的5‘一NcR277bp核昔酸与呼肠孤病毒一3LZ基因3464一3739bP序列雷同,调换了BTV的57片段s‘一CR13一303bp长为29obp的序列。这些成果表明BTV一HbC3株是蓝舌病毒,并有可能是一种新的基因型蓝舌病毒。


以上为本篇毕业论文范文蓝舌病毒BTV-HbC_3株与蓝舌病毒BTV-10型的比较研究的介绍部分。
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