氮素对羽叶决明单宁含量的影响及DFR基因的克隆

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氮素对羽叶决明单宁含量的影响及DFR基因的克隆

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毕业论文范文题目：氮素对羽叶决明单宁含量的影响及DFR基因的克隆，论文范文关键词：氮素对羽叶决明单宁含量的影响及DFR基因的克隆
氮素对羽叶决明单宁含量的影响及DFR基因的克隆毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：羽叶决明(Chamaecristanictitans)是一种豆科决明属、热带多年生牧草,存在明显的耐瘠、耐酸、抗旱性强等特点,目前在福建、江西、湖南等地得到广泛种植,广泛用于红壤改进、水土保持跟畜牧养殖。羽叶决明在初花期的养分含量最高,其粗蛋白含量达15.9%。但因为含有较高的缩合单宁含量,影响了羽叶决明的畜牧利用。本研究设计0、15、30、45、60、75、90mg/kg·N7个氮素梯度处理(分辨用CK、处理A、B、C、D、E、F表示),测定羽叶决明初花期时茎、叶组织中的缩合单宁含量,摸索氮素对羽叶决明缩合单宁含量的影响;同时测定把持缩合单宁合成的关键酶二氢黄酮醇-4-（本文此处忽略..）还原酶(DFR)的活性;并对DFR基因进行了克隆,检测不同处理、不同组织中DFR基因的表白情况,以深刻懂得牧草中缩合单宁的合成机制,为人为调控提供分子生物学基本。重要成果如下:1、采取香草醛盐酸法,测定7个氮素梯度处理的羽叶决明的茎、叶中缩合单宁(CT)含量,成果表明羽叶决明叶片的CT含量明显高于茎,而且CT含量跟着氮素施用量的增加而总体浮现降落趋势,阐明氮素对缩合单宁的生成有必定的克制造用。在7个氮素梯度处理中,羽叶决明叶中的CT含量由14.78%逐步降落到1.14%;而羽叶决明茎中的CT含量的变更表示为,在低氮梯度处理中有所回升,在处理B达到峰值(4.62%),而后（文章此处忽略..）敏捷降落并终保持在牢固程度(0.98%～1.14%)。2、采取凯氏定氮法,测定7个氮素梯度处理的羽叶决明的茎、叶中粗蛋白(CP)含量,成果表明羽叶决明叶片的CP含量明显高于茎,然而跟着氮素施用量的增加CP含量并不大幅度的增加,只是略微有所回升,阐明氮素对植株粗蛋白的含量不明显的影响。在不同氮素梯度处理中,羽叶决明叶中的CP含量由18.52%增加到22.30%;而羽叶决明茎中的CP含量的增幅更小,7个氮素梯度处理中CP含量在5.73%～7.98%之间。3、采取持续监测法,测定不同氮素梯度处理后羽叶决明茎叶植株鲜样中二氢黄酮醇-4-还原酶(DFR)的活性表明,DFR酶活性与缩合单宁含量呈明显的正相干性(r（文章此处忽略..）茎=0.991,r叶=0.945)。叶中DFR活性从CK处理的310.1U/g降落到处理F的31U/g;茎中DFR酶活性同样在低氮梯度处理中略有回升,之后从处理B的103.69U/g敏捷降落并保持在牢固程度(约50U/g)。4、采取RT-PCR方法,克隆得到羽叶决明DFR基因的cDNA片段,长度为600bp,包含一个编码200个氨基酸残基的浏览框,命名为CnDFR。序列比对发明,CnDFR编码的氨基酸与其它动物DFR蛋白基因有很高的同源性。蛋白质基本理化性质的分析,揣测CnDFR编码蛋白,切实践绝对分子品质为22421.6KDa,猜测pI值为5.23,实际分子式为C1014H1568N254O301S9,不牢固系数为39.74,揣测CnDFR（略..）编码蛋白是一个绝对牢固的蛋白。5、采取实时荧光定量PCR,检测不同氮素处理后DFR基因在茎叶中的表白差别。总体上DFR基因在茎叶中表白的变更趋势是先回升后降落,之后又回升。在较低施氮程度下的表白差别变更与缩合单宁含量、DFR酶活性的变更是一致的。

以上为本篇毕业论文范文氮素对羽叶决明单宁含量的影响及DFR基因的克隆的介绍部分。

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