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猪四个转录因子基因克隆、表达、定位及其与部分性状的关联分析

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毕业论文范文题目:猪四个转录因子基因克隆、表达、定位及其与部分性状的关联分析,论文范文关键词:猪四个转录因子基因克隆、表达、定位及其与部分性状的关联分析
猪四个转录因子基因克隆、表达、定位及其与部分性状的关联分析毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:转录因子是真核表达调控中非常重要的一类反式作用因子,在细胞的增殖、分化与动物的生长发育中起着关键的作用。随着动物基因组计划的进行,许多影响猪经济性状的重要基因逐渐被发现,取得了广阔的应用前景。近些年来,国内外已经研究鉴定了许多与猪生长发育有关的重要转录因子,为猪的育种奠定了基础。但仍有许多重要的转录因子在猪上还未研究。本研究利用生物信息学与分子生物学技术相结合的方法,克隆和定位了四个转录因子基因,取得了如下成果:1.利用生物信息学(文章此处忽略..)结合RT-PCR克隆获得了猪TEF-1、RTEF-1、KLF6和KLF7四个转录因子基因完整编码区的cDNA序列。2.利用RH克隆板对TEF-1、RTEF-1、KLF6和KLF7四个基因分别进行了染色体精细定位,结果表明TEF-1基因定位于SSC2p14—2p17,与SW1857连锁(LOD值为9.77);RTEF-1基因定位于SSC5q24-5q25,与SW1987连锁(LOD值为6.29);KLF6基因定位在SSC10q14-q16,与SW1041连锁(LOD值为6.39);KLF7则定位在SSC15q24,与SWR1002连锁(LOD值为11.3)。3.采用半定量(略..)RT-PCR技术检测基因的表达水平,结果表明猪TEF-1基因在所检测的90天胚胎组织中广泛表达,其中在肝和肺中表达量较高,在成年组织中也是广泛表达,肌肉中表达量最高,不同时期肌肉组织中表达量呈上升趋势。RTEF-1基因在检测的90天胚胎组织中广泛表达,其中肝、肺和肌肉中表达量较高,而且在肌肉组织中存在两种转录本;两种转录本在成年肌肉组织中特异表达,且表达量均较高。对KLF6和KLF7基因组织表达谱检测,结果表明KLF6和KLF7都是广泛表达的转录因(文章此处忽略..)子基因。4.采用PCR—RFLP方法检测了TEF-1基因5’非翻译区(UTR)中距离起始密码子154bp的一个碱基突变位点,并在本室与通城县畜牧局共同组建的试验群体中检测了TEF-1基因5’非翻译区的突变位点的多态性,结果表明,该基因5’非翻译区的突变位点与猪出生至上市日增重显著相关(P<0.05)。发现了已克隆KLF6基因cDNA序列的两个错译突变C459G和C778T,分别导致脯氨酸/精氨酸和丙氨酸/缬氨酸的改变,在本室与通城县畜牧局共同组建的试验群体中检测并没有发现其(文章此处忽略..)与生长、肉质等性状有显著的关系。5.构建猪RTEF-1基因重组原核表达载体pET28a-RTEF-1,利用SDS-PAGE检测出该重组原核表达载体成功表达出了猪RTEF-1蛋白,并用亲和层析技术纯化出了该蛋白。


以上为本篇毕业论文范文猪四个转录因子基因克隆、表达、定位及其与部分性状的关联分析的介绍部分。
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