脾细胞门静脉注射诱导家犬肾移植免疫耐受的研究

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脾细胞门静脉注射诱导家犬肾移植免疫耐受的研究

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毕业论文范文题目：脾细胞门静脉注射诱导家犬肾移植免疫耐受的研究，论文范文关键词：脾细胞门静脉注射诱导家犬肾移植免疫耐受的研究
脾细胞门静脉注射诱导家犬肾移植免疫耐受的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：在器官移植中，排斥反应一直是影响移植成功率的最主要问题。随着免疫抑制药物的不断更新与合理使用，移植器官的成功率及术后存活时间也在逐渐提高，但是高昂的药物费用和各种副作用让许多患者仍难以接受。最主要的是免疫抑制药物无法解决机体对移植物的慢性排斥反应，最终导致移植器官失去功能。要彻底解决器官移植排斥的问题，关键是诱导受体对供体器官的免疫不应答，即免疫耐受。肝脏作为体内特殊的免疫器官，在免疫耐受诱导中的作用逐渐被人们所认识。研究表明，受体肝脏内kupffer细胞对经门静脉注射的供体淋巴细胞的选择性捕获，是门静脉免疫耐受诱导和维持的关键。该理论在小体积动物实验中已得到证实，但在大型哺乳类动物中进行的此类实验还未见报道。本实验以家犬作为研究对象，进行了以下研究：目的：以家犬作为研究对象，观察肝门静脉注射供体脾细胞的方法是否能在肾移植家犬中诱导免疫耐受。方法：1、动物分组：A组对照组：家犬5只，单纯进（文章此处忽略..）行肾脏移植，并为实验B组和C组提供脾细胞和移植肾脏。B组门静脉注射组：家犬5只，肾移植前5-7天门静脉注射供体脾细胞。C组环孢素A组：家犬5只，肾移植术后给予环孢素A10-15mg/kg.d。D组家犬5只，为对照组家犬进行肾移植提供移植肾脏。2、脾细胞的制备：无菌取脾脏，在100目钢丝上研碎，收集细胞后离心，除去上清液后，用Tris-NH4Cl溶解红细胞，用RPMI1640液调整细胞数为2*107ml-1备用。3、供体脾细胞门静脉注射及肾脏移植：B组家犬麻醉后打开腹腔，注射器抽取脾细胞悬液0.5ml，沿肝门静脉注入。术后5-7天进行肾脏移植。移植前A组和D组家犬给予低分子肝素抗凝，手术取出肾脏后离体肾保存液灌注。分别将离体肾脏移植到B组及C组家犬的髂窝处，输尿管口暴露于体外。同样方法将D组家犬单侧肾脏取出后移植到A组家犬髂窝处。术后C组家犬每日将赛斯平按10-15mg/kg的量加入食物中。结果：WP=251、肾功能检测结果：各组家犬术前肾功能无显著差别；而（略..）术后1天和术后5天时，对照组家犬肾功能指标显著高于实验B组和C组，差异具有显著性；B组和C组之间血肌酐值差异不显著。2、术后各组家犬的存活时间：术后B组、C组家犬的存活时间均较对照组长，差异有显著性；而B组与C组之间存活时间相近，差异无显著性。3、术后家犬血清中的IL-2和IL-6浓度测定：结果显示术后对照组IL-2和IL-6浓度均显著高于B组和C组；而B组和C组之间差异不显著。4、病理学检查结果：对照组肾脏光镜下可见肾间质水肿、淋巴细胞浸润等肾脏急性排斥反应的病理改变。实验B组和C组肾脏光镜下可见轻度肾小球毛细血管壁皱缩，基底膜增厚。讨论：肝脏作为机体内最大的网状内皮细胞系统，能吞噬大量的异系抗原。肝脏内的Kupffer细胞已经被证明具有抗原呈递细胞的功能，其细胞表面能够表达主要组织相容性复合体Ⅱ类抗原，能将外来抗原以耐受原的形式呈递给反应性T细胞。脾脏主要由淋巴细胞组成，含有大量的供体抗原。当供体脾（文章此处忽略..）细胞经门静脉进入肝脏后，即被肝内Kupffer细胞吞噬，与供体发生反应的淋巴细胞克隆就聚集在肝脏内，此时肝脏细胞产生一种急性期蛋白,它可破坏与供体发生反应的淋巴细胞克隆，导致克隆清除，产生免疫耐受。还有人[24]认为肝脏内的Kupffer细胞具有抑制迟发性变态反应的功能，在肝脏内它对淋巴细胞的免疫耐受有着重要的作用。实验证实受体肝脏内kupffer细胞对门静脉注射的异基因供体淋巴细胞的选择性捕获是门静脉耐受诱导和维持的关键[1]，该理论在大鼠等小动物实验中已经反复得到证实，但在大型动物实验中成功诱导出免疫耐受者还未有报道。我们应用家犬作为实验动物，使用制备好的供体脾细胞,经过受体门静脉输入肝内，输注后5-7天进行肾脏移植，术后观察各组家犬肾功能变化情况，观察家犬的术后存活时间，移植肾急性排斥指标IL-2、IL-6水平以及移植肾脏病理。IL-2是由Th1细胞产生的重要免疫调节因子。移植肾发生排斥反应时，T（略..）h1细胞被异体抗原刺激激活后，IL-2分泌增加，而IL-2升高促使IL-6分泌增加。因此，肾移植后IL-2、IL-6浓度明显升高，预示急性排斥反应发生[25、26]。本实验中，对照组家犬术后3天IL-2、IL-6浓度均显著高于实验B组和C组，肾功能指标也在术后明显升高，表明未进行门静脉注射及应用环孢素AWP=26的家犬在术后发生了急性排斥反应，移植肾的病理检查结果也证实了急性排斥反应的发生；而实验B组在术后1天和5天时，血肌酐值升高不及对照组显著，IL-2和IL-6水平较低，与应用免疫抑制剂的C组无显著差异，而且存活时间显著长于对照组，充分说明经门静脉注射脾细胞能够诱导肾移植后家犬的免疫耐受，在未应用免疫抑制剂的情况下，起到抑制免疫排斥反应发生、延长移植肾存活的作用。

以上为本篇毕业论文范文脾细胞门静脉注射诱导家犬肾移植免疫耐受的研究的介绍部分。

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