哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在流感病毒感染中的作用

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哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在流感病毒感染中的作用

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毕业论文范文题目：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在流感病毒感染中的作用，论文范文关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在流感病毒感染中的作用
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在流感病毒感染中的作用毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的：研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofRapamycin,mTOR)在流感病毒感染过程中对宿主细胞蛋白及病毒NP蛋白表达的影响。方法：在人肺腺癌细胞A549细胞,接种流感病毒毒株PR8株(InfluenzaAvirusPuertoRico/8/34-H1N1),在感染后5h,采用Western-blot检测Akt、4E-BP1等蛋白及磷酸化水平；采用常规分子克隆技术构建流感病毒NS1蛋白真核表达质粒pcDNA3.1-NS（本文此处忽略..）l;在A549细胞系,检测NS1蛋白表达对荧光素酶报告基因(在pcDNA3.1-NS1质粒转染24h后转染pGL3质粒)表达活性的影响；使用PI3K抑制剂LY294002及两种mTOR抑制剂(Rapamycin和Torinl)阻断相应分子的功能,以确定mTOR影响流感病毒感染过程所涉及的上下游分子。结果：流感病毒感染后5h,Akt和4E-BP1的磷酸化水平显著提高,提示mTOR可能在流感病毒感染中起一定的作用。PI3K的抑制剂LY294002可恢复Akt和4E-BP1的低磷酸化（略..）状态。lnTORC1的抑制剂Rapamycin,mTORC1/2的抑制剂Torinl也可下调4E-BP1的磷酸化水平,其中Torin1对4E-BP1磷酸化水平的抑制效果显著强于Rapamycin,接近LY294002,提示mTORC2复合物参与了流感病毒诱导的mTOR活化过程。质粒表达NS1蛋白可增加细胞Akt和4E-BP1的磷酸化。pGL3质粒与pcDNA3.1-NS1质粒共转染实验显示,pcDNA3.1-NS1组萤火虫荧光素酶表达活性明显高于pcDNA3.1对照（本文此处忽略..）组,而LY294002、Rapamycin和Torin1则不同程度的抑制了荧光素酶的表达,其效应大小与这三种抑制剂对4E-BP1的磷酸化下调效应大小相一致。在流感病毒感染后5h,在本研究所使用的抑制剂浓度下,Western-blot检测结果显示,LY294002、Rapamycin和Torin1三种抑制剂对流感病毒NP蛋白的表达并无显著影响。结论：流感病毒NS1蛋白可以通过PI3K-Akt激活细胞的1nTOR-4E-BP1通路,而且nTORC1和mTORC2两（本文此处忽略..）种复合物均参与了4E-BP1的磷酸化,mTORC2是Akt的上游分子。NS1蛋白对于流感病毒感染细胞维持一定水平的细胞蛋白表达有重要作用,而且,这是通过、至少部分是通过mTOR-4E-BP1通路来实现的。

以上为本篇毕业论文范文哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在流感病毒感染中的作用的介绍部分。

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