犬细小病毒北京株分离和动物发病模型建立

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犬细小病毒北京株分离和动物发病模型建立

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毕业论文范文题目：犬细小病毒北京株分离和动物发病模型建立，论文范文关键词：犬细小病毒北京株分离和动物发病模型建立
犬细小病毒北京株分离和动物发病模型建立毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：从北京地区疑似犬细小病毒感染的病死犬血样粪便中分离到5株病毒并进行病毒鉴定,证明为犬细小病毒。对5株分离病毒VP2基因进行扩增和序列分析。选取其中一株分离病毒(BJ5)做动物发病模型攻击病毒并建立犬细小病毒动物发病模型,为评价新型犬细小病毒疫苗效力做准备。以CrFK细胞做病毒分离细胞,病料接入细胞经2次冻融传代后出现稳定的血凝特性(HA),并能被CPV标准阳性血清所抑制;以荧光标记的CPV单克隆抗体做免疫荧光试验,结果显示分离病毒感染的细胞出现蓝绿色的胞浆荧光;用犬细小病毒特异性鉴定引物对病毒基因进行扩增,能够扩增出预期的（此处忽略..）583bp基因片段。上述鉴定结果证明5株分离病毒均为CPV。采用PCR方法分别对5株犬细小病毒VP2基因片段进行扩增并对该片段进行序列测定和DNAStar软件分析。所扩增VP2基因片段长度为1755bp,并与GenBank收录的部分CPV的VP2基因进行同源性比较及系统发育树分析。5株分离病毒同美国株CPV-b(type2)、CPV-15(type2a)、CPV-39(type2b)比较,核苷酸同源率为99.0%~99.5%,氨基酸同源率为98.6~99.5%,表明VP2基因变异相对较少,5株分离病毒与CPV-2a型毒株第426位氨基酸相同,均为Asn;5株分离病毒的VP2基因与CPV-2a亚型毒株的氨（略..）基酸的相似性超过98%,通过系统发育树分析表明,5株分离病毒处于同一分支,与标准参考毒株差异不显著。为确定攻毒途径和最低攻击剂量,建立犬细小病毒动物发病模型,选取CPV血凝抑制价≤10的阴性健康犬,以分离病毒BJ5作为攻击病毒。第1次实验为攻毒途径实验,选取6只实验犬分为3组,每组2只,第1组皮下注射分离病毒1mL/只;第2组口服分离毒1mL/只;第3组为对照组,皮下注射CrFK细胞液1mL/只。攻击病毒后,每天观察临床症状(包括饮欲、食欲、粪便性状、精神状态等);测定直肠体温;采集肛拭子用于血凝试验以检测排毒;分别于第0,7,14天采血分离血清,通（本文此处忽略..）过HI方法检测CPV抗体水平。结果显示:第1,2组实验犬攻击分离病毒14天内均表现为食欲减退,饮欲增加,腹泻及血便等典型临床症状;直肠温度升高;两组实验犬粪便中可检测到排毒;对照组无临床症状。然而第1组与第2组相比较,动物攻毒后潜伏期较短,临床症状较明显。第2次实验为最低攻击剂量实验,共设5组(A,B,C,D,E),每组2只动物,A、B、C、D组为攻毒组,皮下注射攻毒,攻击剂量分别为103.5TCID50/mL,102.5TCID50/mL,101.5TCID50/mL,100.5TCID50/mL,1mL/只;E组为对照组,皮下注射CrFK细胞培养液,1mL/只。结果显示:A（略..）,B组动物均发病出现典型的细小病毒感染的症状,C组犬出现轻微临床症状,体温升高,粪便中检测到排毒,但与B组相比较潜伏期较长,症状不明显;D组和E组无临床症状。上述实验表明犬细小病毒发病模型以皮下注射为最佳途径,以102.5TCID50/mL,1mL/只为最佳攻毒剂量。

以上为本篇毕业论文范文犬细小病毒北京株分离和动物发病模型建立的介绍部分。

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