木蹄层孔菌漆酶的产生、分离纯化及酶学性质研究

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木蹄层孔菌漆酶的产生、分离纯化及酶学性质研究

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毕业论文范文题目：木蹄层孔菌漆酶的产生、分离纯化及酶学性质研究，论文范文关键词：木蹄层孔菌漆酶的产生、分离纯化及酶学性质研究
木蹄层孔菌漆酶的产生、分离纯化及酶学性质研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：本文通过对东北林业大学微生物及免疫学实验室保存的27株(种)大型真菌木素氧化酶系组成、活性及对染料脱色作用的研究,筛选出木蹄层孔菌作为产漆酶的菌株。并进一步对该菌产漆酶发酵条件、漆酶的纯化及酶学性质进行了研究。获得如下结果:(1)采用丁香醛连氮、苯胺蓝平板脱色等4种方法,定性检测了株(种)大型真菌的木素氧化酶系组成。结果表明5个菌种同时具有Lac、Lip、Mnp3种酶的活性,5个菌种同时具有Lac、LiP2种酶（本文此处忽略..）的活性,8个菌种具有1种酶的活性;12个菌种具有漆酶活性。选择其中生长速度快、漆酶活性高的5个菌种进行漆酶产生的研究,发现木蹄层孔菌在诱导、静止培养条件下产生的漆酶酶活峰值高达9496U/mL,远远高于其它已报道过的菌种,说明木蹄层孔菌静止培养可代替振荡培养进行漆酶产生的后续研究。木蹄层孔菌等5种真菌对刚果红等4类染料均具有高效广谱的脱色作用,其中木蹄层孔菌效果最好。(2)利用正交实验对木蹄层孔菌产漆酶发酵条件（略..）进行研究,得到优化培养基组成为(/L):淀粉20g;藜芦醇2.5g;蛋白胨2.5g;Tween800.15%;CuSO_40.1mM(调节pH至4.0,温度为30℃)。(3)通过DEAF-SepharoseFF离子交换层析和SephadexG-75凝胶过滤等纯化技术对木蹄层孔菌胞外漆酶进行了纯化,最终纯化倍数达11.93,回收率为20.18%。(4)以ABTS作为底物时木蹄层孔菌纯化后的漆酶的最适pH为2.8,在pH2.0-5.0之间维持较高的酶活,超过pH5.0漆酶活性急剧下（本文此处忽略..）降;纯化后的漆酶最适反应温度为60℃,在20-65℃范围内较稳定,超过65℃酶活力下降迅速。纯化后的漆酶对底物ABTS的催化效率较高,米氏常数为0.068mmol/L。几种漆酶的抑制剂中的NaN_3、半胱氨酸和DTT对漆酶活力有强烈的抑制,而金属离子鳌合剂EDTA对漆酶活力的抑制程度较低。Zn~(2+)、Mg~(2+)、Ca~(2+)等金属对漆酶活性有明显的激活作用。染料降解实验发现木蹄层孔菌与染料的共培养体系、木蹄层孔菌纯化（略..）后的漆酶均对偶氮类染料刚果红、三苯甲烷类染料结晶紫、杂环类染料亚甲基兰、蒽醌类染料茜素红四类染料有很高的降解作用。显示了木蹄层孔菌及其所产生的漆酶在染料降解的应用上具有很强的工业应用潜力。

以上为本篇毕业论文范文木蹄层孔菌漆酶的产生、分离纯化及酶学性质研究的介绍部分。

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