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小黄菊抗鞘翅目昆虫转基因研究

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毕业论文范文题目：小黄菊抗鞘翅目昆虫转基因研究，论文范文关键词：小黄菊抗鞘翅目昆虫转基因研究
小黄菊抗鞘翅目昆虫转基因研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：小黄菊（Dendrathemagrandiflorum‘XiaoHuang’Ju）是我国药用菊类9大栽培品系（贡菊、湖菊、小白菊、大白菊、小黄菊、滁菊、亳菊、大马牙、大怀菊）之一，在河南、浙江、江苏、安徽、山东、河北等省均有种植。小黄菊是一种重要的药用菊科多年生草本植物，既可入药，又可加工成多种饮品，同时还可供观赏，加强小黄菊育种工作具有很高的经济效益和社会效益。小黄菊在栽培过程中常遭受多种害虫侵害，影响生长和菊花质量。在栽培过程中常常需要使用杀虫剂来防止和控制虫害的发生。化学杀虫剂存在环境污染和残留问题，要达到减少或不使用杀（本文此处忽略..）虫剂的目的，就需要培育优良的抗虫品种。传统育种方法由于基因库所限而进展不大，植物基因工程可以将外源基因导入小黄菊中，培育出抗虫品种，通过其它的基因转化改变其园艺特性，甚至可以将其作为一个生物反应器表达人们所需的蛋白等。转基因技术的发展为菊花育种提供了一条新的途径。本研究是将抗鞘翅目昆虫的CryⅢ型基因导入到菊花中，获得抗鞘翅目害虫的菊花，填补无抗鞘翅目昆虫菊花品种的空白。本实验研究首先建立了小黄菊的遗传转化再生体系，以小黄菊茎段、叶盘为外植体,选用MS培养基为基本培养基，附加激素6-BA和NAA，通过研究不同激素浓度组合对外植（本文此处忽略..）体愈伤诱导及不定芽分化的影响，建立了较好的遗传转化再生体系。试验结果表明小黄菊茎段、叶盘最适分化培养基分别为MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L和MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L；小苗的最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L，生根率可达100%；40mg/L卡那霉素可以抑制茎段的分化，10mg/L卡那霉素可以抑制叶片的分化，20mg/L卡那霉素可以抑制分化小苗的生根。该研究结果为小黄菊的基因转化工作奠定了基础。cry3Aa、modifiedCry3由中国林业科学院林研所生物技术室提供。cry3Aa克隆自Bt886菌株。苏云金杆菌和植物对遗传密码子（此处忽略..）的偏好存在很大差异，WP=7modifiedCry3的设计原则是在不改变cry3Aa氨基酸序列的前提下，运用杨树的密码子对差异密码子进行了替换，改造得到基因modifiedcry3。本实验构建了抗鞘翅目昆虫基因cry3Aa、modifiedcry3的植物表达双元表达载体pBI121-cry3Aa，pBin438-modifiedcry3。并运用农杆菌叶盘法和基因枪法对小黄菊进行了转化。当经过农杆菌侵染后，叶片、茎段分别置于含10mg/L和40mg/L卡那霉素及附加500mg/L的羧苄青霉素（抑制农杆菌生长）分化培养基上，在光照周期16h／8h，25℃条件下进行选择培养。每2-3周（略..）后，外植体更换一次选择培养基令其诱导分化，经多轮继代选择培养筛选工作得到抗性苗。采用基因枪转化时，将轰击后的外植体转入分化培养基中，在28℃、黑暗培养2－4d。过渡培养后的外植体转入含有10mg/L（叶片）、40mg/L（茎段）卡那霉素的分化培养基中进行选择培养，直至再生出苗。抗性苗先后经PCR和狭槽杂交进行了分子验证，最终确定小黄菊转cry3Aa基因植株4棵，转modifiedcry3基因植株5棵。

以上为本篇毕业论文范文小黄菊抗鞘翅目昆虫转基因研究的介绍部分。

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