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辣椒疫病抗性相关基因CanNADPH和CanML的遗传转化及抗病性分析

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毕业论文范文题目:辣椒疫病抗性相关基因CanNADPH和CanML的遗传转化及抗病性分析,论文范文关键词:辣椒疫病抗性相关基因CanNADPH和CanML的遗传转化及抗病性分析
辣椒疫病抗性相关基因CanNADPH和CanML的遗传转化及抗病性分析毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:辣椒是茄科辣椒属的多年或一年生蔬菜作物,在我国各地普遍栽培。辣椒疫病在我国许多地区都有发生,已成为我国辣椒产业发展的重要限制因素之一。辣椒CanNADPH基因和CanML基因是西北农林科技大学园艺学院辣椒课题组分别以高抗辣椒疫病品种AA3和AA11为试材,在辣椒疫霉菌的侵染下克隆得到的疫病抗性相关基因。本研究分别以辣椒CanNADPH基因和CanML基因为目的基因,利用载(本文此处忽略..)体pBI121构建了植物表达载体pBI121-NADPH和pBI121-ML,通过农杆菌介导的遗传转化技术分别将CanNADPH基因和CanML基因转化辣椒感病品种B12,并利用离体叶片接种鉴定技术鉴定了转基因植株对辣椒疫霉菌的抗性。主要研究结果如下:1.构建了pBI121-NADPH植物表达载体。用BamHⅠ和SacⅠ分别消化在两端加载了酶切位点的CanNADPH基因和载体pBI121,采用凝胶回收(此处忽略..)试剂盒分别回收具有BamHⅠ和SacⅠ粘性末端的CanNADPH基因片段和pBI121线状载体片段。然后用T4DNA连接酶连接构建成pBI121-NADPH植物表达载体。连接产物转化大肠杆菌DH5α。用质粒提取试剂盒提取阳性质粒,冻融法转化农杆菌EHA105感受态细胞。PCR和酶切鉴定表明pBI121-NADPH表达载体构建成功。2.利用同样的策略构建了pBI121-ML植物表达载体。PCR分析和酶切(略..)鉴定表明pBI121-ML植物表达载体构建成功。3.分别获得了转化CanNADPH基因和CanML基因的转基因植株。将辣椒感病品种B12的种子经表面消毒后在1/2MS培养基上培养,约两周后选择健壮的无菌幼苗进行外植体的准备,外植体经预培养后用农杆菌菌液侵染,然后分别在抗性芽分化、伸长及生根培养基上加入卡那霉素进行筛选培养。对得到的抗性植株进行PCR和RT-PCR分子检测,结果表明,(此处忽略..)获得了的5个转化CanNADPH基因的转化株系和4个转化CanML基因的转化株系。4.应用辣椒疫病抗性离体叶片鉴定技术,对转化CanNADPH基因的转基因植株的抗病性进行了鉴定。结果表明,转基因植株的发病率较非转基因植株降低了22.2%,其病情指数降低了46.5%。


以上为本篇毕业论文范文辣椒疫病抗性相关基因CanNADPH和CanML的遗传转化及抗病性分析的介绍部分。
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