独蒜兰组织培养及其生物多样性的ISSR分析

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独蒜兰组织培养及其生物多样性的ISSR分析

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毕业论文范文题目：独蒜兰组织培养及其生物多样性的ISSR分析，论文范文关键词：独蒜兰组织培养及其生物多样性的ISSR分析
独蒜兰组织培养及其生物多样性的ISSR分析毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：独蒜兰属是兰科植物十分重要的一个属，全属约有2弓种。我国约有16个种。独蒜兰一般为陆生、岩生或附生于从海拔1000米到4200米亚热带山区，主要以喜马拉雅区域为主。我国在野外收集独蒜兰种质资源主要为园艺需要，虽然小部分种类可以通过种子的萌发繁殖及驯化，但是大部分还是野外采集为主。大多数独蒜兰只有一个叶片，有皱褶，一般在冬季凋落，少有宿存。独蒜兰的花一般为粉红色，也有白色和黄色，但较少。萼片离生，唇瓣明显大于萼片，不裂或不明显3裂，基部上部边缘啮蚀状或撕裂状，上面具有2至数条纵皱褶片或沿脉具有流苏状毛。近几年，虽然有一些研究关于独蒜兰从萌发到形成小植株的报道，但是目前来讲，国内外还没有系统地进行独蒜兰属的离体繁殖、植株再生和分子方面的研究，本研究选择我国云南以及越南共13个独蒜兰品种，从细胞学和DNA分子角度，分析了它们的遗传多样性水平和遗传结构状况，对毛唇独蒜兰以及其（本文此处忽略..）他多个种的离体繁殖技术进行了研究，得出如下结论：1．以独蒜兰的原球茎切块作为外植体进行快速繁殖的研究，结果表明：在1／2MS培养基中，6-BAlmg／L时外植体诱导丛生芽的出芽率最高；在TH培养基中，NAA0.2mg／L+6-BA1mg／L时外植体诱导丛生芽的出芽率最好，并且增殖倍数比1／2MS多。用于诱导丛生芽的原球茎切块大小应大于0.5×0.5×0.5cm~3。原球茎切块在光照长度12小时／天、光照强度为800-1200lx以及温度25±2℃培养。秋花独蒜兰(Pleionemaculate)在TH+NAA0.2mg／L+6-BA1mg／L下丛生芽诱导率为100％；毛唇独蒜兰a(Pleionehookeriana)相同培养基下的丛生芽诱导率为93％，在1／2MS+6-BA1mg／L下丛生芽的诱导率为80％；陈氏独蒜兰(Pleionechunii)在1／2MS+NAA0.2mg／L+6-BA1mg／L培养基下的丛生芽的诱导率位为75％；黄花独蒜兰(Ple（文章此处忽略..）ioneforrestii)在1／2MS+NAA1mg／L+6-BA0.2mg／L培养基的培养下丛生芽的诱导率都为100％；大花独蒜兰(Pleionegrandiflora)在1／2MS+6-BA1mg／L下诱导率为60％；四川独蒜兰(Pleionelimprichtii)在1／2MS+NAA0.2mg／L+6-BA1mg／L下诱导率为80％；耳瓣独蒜兰(Pleioneaurita)在1／2MS+NAA0.2mg／L+6-BA2mg／L下丛生芽的诱导率为75％。培养基TH+NAA0.1mg／L+6-BA0.5mg／L+土豆50g／L可作为继代培养基复壮丛生芽。在1／2MS培养基中，0.5mg／LNAA和0.5mg／L6-BA有利于独蒜兰的丛生芽的生根。同时通过对原球茎的进一步切割也有利于其本身的增殖，但切割方式上一刀切割原球茎的增殖率要高于两刀切割的增殖率。2．用ISSR分子标记技术对独蒜兰属种间共13个样以及同种不同个体间进行了PCR扩增。扩增（此处忽略..）结果为：从100个引物中筛选出5个扩增条带多，信号强，背景清晰的引物，分别是(AC)_8T、(TG)_8C、(CT)_8RG等5个引物，除895和58R外其共同特征是C和A两个碱基的8个串联重复以及CT和TG两个碱基对的串联重复，说明独蒜兰属DNA分子中广泛存在着CA或AC以及CT或TG的串联重复序列。5个ISSR引物和引物58R对独蒜兰的13个种进行了PCR扩增，5个引物共得到265条扩增带，每个引物对于13个种的独蒜兰种共可扩增出37—97条多态性带，平均53条，DNA片断大小分布在200—1500bp之间。多样性分析结果为：独蒜兰同种不同个体间的扩增没有出现特异性条带，表明独蒜兰同种不同个体间具高度的遗传一致性；独蒜兰属13个种的扩增电泳图谱经POPGENE软件分析，表明毛唇独蒜兰b与美丽独蒜兰以及四川独蒜兰的距离最远，其次是四川独蒜兰和大花独蒜兰的距离，岩生独蒜兰与秋花独蒜兰和疣鞘独蒜兰有较低的相异系数，秋花独蒜兰和疣鞘（此处忽略..）独蒜兰的距离最小。UPGMA聚类结果显示，13种独蒜兰主要聚类分布为：秋花、疣鞘和岩生聚成一支，毛唇b和独蒜兰聚成一支，再与黄花、云南、毛唇a和大花独蒜兰聚成一大类；陈氏和耳瓣独蒜兰聚成一支，美丽和四川独蒜兰聚成一支，二者组成另一大类。与形态学观察上以春季开花和秋季开花的分类有相似之处，以ISSR为基础的UPGMA聚类结果与核糖体序列ITS的结果基本吻合，说明ISSR可以用于独蒜兰的分类研究。

以上为本篇毕业论文范文独蒜兰组织培养及其生物多样性的ISSR分析的介绍部分。

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