根癌农杆菌介导的菊花遗传转化体系的建立及ipt基因的导入

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根癌农杆菌介导的菊花遗传转化体系的建立及ipt基因的导入

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毕业论文范文题目：根癌农杆菌介导的菊花遗传转化体系的建立及ipt基因的导入，论文范文关键词：根癌农杆菌介导的菊花遗传转化体系的建立及ipt基因的导入
根癌农杆菌介导的菊花遗传转化体系的建立及ipt基因的导入毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：菊花是我国的传统花卉，也是世界四大鲜切花之一，占切花总量的23％。由于菊花的传统育种方式是利用芽变(菊花雌雄性性器官退化)的方法来选育新品种，所以育种的速度慢，周期长，定向性差。利用基因工程技术，有目的地向菊花中导入一些基因，培育抗病性好、色香形独特、观赏价值高的菊花新品种，不但可以有目的地改良特定性状，还可以缩短育种年限和加快育种进程。本研究通过再生试验选择了两个品种(山城之光和日本小黄)来作为遗传转化（略..）的材料，山城之光为切花菊，日本小黄为小菊。所选用的外源基因为抑制叶片衰老的SAG-IPT基因，以期得到耐贮运、瓶插寿命长的切花菊山城之光和抗衰老、花期长的绿化小菊日本小黄。1．建立了以幼叶和茎段为外植体的再生体系。取植株刚展开的幼叶或幼茎，消毒后接入MS1(MS0+1.0mg/L2，4-D+0.1mg/L6-BA)中预培养2～6天后，转入MS2(MS0+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA)(幼叶)、MS3(MS0+3.0mg/L6-BA+0.1mg（文章此处忽略..）/LNAA)(茎段)后可直接再生出芽。其中，山城之光和日本小黄的幼叶经预培养后再生率可达100%，而白雪、光辉、冬青、白绣纺四个品种的再生率则较低，难以满足遗传转化的需要。日本小黄茎段再生率也达92%，山城之光再生率不足70%，其他品种的茎段再生率则极低。再生出的芽在1/2MS培养基上经7～10天可生根，生根率达100%。2．建立了以幼叶为受体的遗传转化体系取切花菊“山城之光”和小菊“日本小黄”的无菌苗叶片，切成4mm~2大小，以OD~600=0.5的（此处忽略..）农杆菌液感染30min，滤除菌液，接入MS1培养基上，于暗处共培养3天。共培养后，以附加有500mg/L的Cef和500mg/L的Carb的MS0液体培养基震荡脱菌培养2小时，无菌水冲洗5次，无菌滤纸吸干水分。然后接入MS2+50mg/LCef的培养基上延迟筛选培养3天，再转入MS2+50mg/LCef+5mg/LKm培养基上进行筛选分化培养。30天后可分化出绿芽，把分化出的绿芽在1/2MS0+10mg/LKm培养基上进行生根筛选，把能够正常生根的（此处忽略..）苗移栽田间，做进一步的鉴定。3．通过PCR扩增表明，转基因植株中可以检测出有目的基因(ipt基因)的存在，目的基因已成功地插入菊花的基因组中。园艺性状观察表明，转基因植株和野生株存在有一定的差异。

以上为本篇毕业论文范文根癌农杆菌介导的菊花遗传转化体系的建立及ipt基因的导入的介绍部分。

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