农杆菌介导单、双价抗虫基因Bt、Bt-pinⅡ基因对观赏羽衣甘蓝的遗

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农杆菌介导单、双价抗虫基因Bt、Bt-pinⅡ基因对观赏羽衣甘蓝的遗

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农杆菌介导单、双价抗虫基因Bt、Bt-pinⅡ基因对观赏羽衣甘蓝的遗毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：观赏羽衣甘蓝(Brassicaoleraceavar.acephala),属十字花科芸薹属甘蓝种的园艺变种,是一种赏食兼用的耐冻优良景观植物。羽衣甘蓝的在生长期易发生虫害,影响其生产及观赏价值。而目前的育种资源中,尚无相应的种质。要解决这两个问题,有希望的途径就是通过现代基因工程技术,引入外源抗性基因,创（本文此处忽略..）制新的抗性种质。但其育种研究尚处于起步阶段,国际上鲜有研究报道,缺乏针对育种目的、育种材料的详细研究资料。国内利用基因工程手段改良其性状还是一个空白。本研究通过基因工程为技术手段,将所克隆的抗虫基因导入观赏羽衣甘蓝,赋予其新的性状,以期获得优良的抗虫种质资源。主要结论如下:1.以8份不同类型羽衣甘蓝的优良（略..）育种品系为试材,建立高频再生体系,筛选出两份材料,其带柄子叶分别在L6(MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L)及L3(MS+6-BA1.5mg/L)培养基中不定芽诱导率为100%,每外植体上的不定芽数高达25个。下胚轴诱导率最高也能达88.33%;2.根据感染时间、共培养时间、外植体的脱菌和Basta选择压的确定等因素与转化频率的相关性研（此处忽略..）究,建立了适合于观赏羽衣甘蓝皱白1的根癌农杆菌介导的转化体系即:侵染时间3-5min;黑暗共培养2天;Basta筛选压为5mg/L;菌液OD值为0.3-0.5;3.克隆了Bt基因和Bt-PinⅡ融合基因,构建了pBAC171、pBAC172和pBAC173三个植物表达载体。通过农杆菌介导法将基因分别导入羽衣甘蓝皱白1,分别获得7株单价和5株双价（本文此处忽略..）抗虫转基因植株;PCR扩增外源Bt和Bt-PinⅡ基因片段,结果都有目的条带;对7株含Bt基因的植株进行southern检测,有5株再生植株的外源基因片段整合到基因组中,其中有1～3个转基因拷贝。

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