火焰卫矛组织培养再生体系优化及遗传转化研究

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火焰卫矛组织培养再生体系优化及遗传转化研究

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毕业论文范文题目：火焰卫矛组织培养再生体系优化及遗传转化研究，论文范文关键词：火焰卫矛组织培养再生体系优化及遗传转化研究
火焰卫矛组织培养再生体系优化及遗传转化研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：火焰卫矛(Euonymusalatus'compacta')属于卫矛科落叶灌木,因其叶片里火焰红色而具有重要的园艺观赏和经济价值,每株成熟的火焰卫矛每年能生产成百上千粒种子。由于通过鸟类和流水的传播,火焰卫矛在美国非常流行,甚至不可控制,破坏其他植物区系,严重威胁生态平衡。本研究以火焰卫矛为研究对象,优化了植株组织培养再生体系,并在此基础上探索农杆菌介导火焰卫矛遗传转化技术,为利用基因工程技术对火焰卫矛进行遗传改（本文此处忽略..）良打下了基础。主要研究结果如下:(1)火焰卫矛植株组培再生体系优化本研究以火焰卫矛成熟胚培养长出的子叶、下胚轴为外植体进行组织培养及植株再生研究,优化了火焰卫矛组织培养再生体系。研究结果表明:成熟胚培养基为WPM+TDZ0.5mg·L~(-1);愈伤组织诱导培养基为WPM+6-BA6mg·L~(-1)+IBA0.2mg·L~(-1);不定芽分化培养基为WPM+6-BA6mg·L~(-1)+IBA0.2mg·L~(-1);不定芽增殖和壮苗培养基为WPM+6-BA4mg·（本文此处忽略..）L~(-1);生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg·L~(-1)+AC0.5g·L~(-1)。移栽基质为营养土,成活率为83.3%。(2)农杆菌介导火焰卫矛遗传转化体系建立以火焰卫矛子叶和下胚轴为转化受体进行遗传转化体系研究,确定了子叶和下胚轴不定芽分化的有效卡那霉素(kan)筛选压分别为60mg·L~(-1)和50mg·L~(-1);而在抑菌剂头孢霉素(cef)和特美汀(Timentin)浓度对比研究中发现,Timentin对不定芽分化的影响要小于头孢霉素(Cef)的影响,Time（本文此处忽略..）ntin浓度为400mg·L~(-1)时,子叶分化率达到23.89%,而Cef在相同浓度下子叶分化率仅为15.56%;并确定Timentin最佳抑菌浓度为200mg·L~(-1)。探讨了遗传转化过程中外植体预培养时间、共培养时间、浸染菌液浓度和浸染时间对遗传转化效率的影响。结果表明,外植体预培养2d,共培养3d,菌液浓度OD600为0.4～0.5,浸染6min为最佳技术参数;在YEP液体培养基中添加100μmol·L~(-1)AS可提高转化率8.8%。(3)转基因植株筛选鉴定通过农杆菌介导法遗传（此处忽略..）转化火焰卫矛,并对转化植株进行GUS组织活性及PCR检测,证明由Barnase和iaaM组成的超级不育表达元件已经整合到火焰卫矛植株,从78株抗性植株中筛选出转基因植株3株。

以上为本篇毕业论文范文火焰卫矛组织培养再生体系优化及遗传转化研究的介绍部分。

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