香石竹再生体系的建立及根癌农杆菌介导的遗传转化体系的研究

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香石竹再生体系的建立及根癌农杆菌介导的遗传转化体系的研究

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毕业论文范文题目：香石竹再生体系的建立及根癌农杆菌介导的遗传转化体系的研究，论文范文关键词：香石竹再生体系的建立及根癌农杆菌介导的遗传转化体系的研究
香石竹再生体系的建立及根癌农杆菌介导的遗传转化体系的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：香石竹(DianthuscaryophyllusL)是世界四大切花之一，在花卉市场中占有重要地位。香石竹的育种目标除观赏性状之外，还有园艺性状，我国目前以链格孢属(altemaria)引起的叶斑病比较普遍且严重，抗病育种已成为香石竹育种的重要目标。另外，耐热性、丰产性也是香石竹育种研究中的重要目标。因此，运用转基因技术，导入目的基因，解决育种中的问题，使香石竹获得目（本文此处忽略..）标性状便具有十分重要的意义。本实验以建立的香石竹高频再生体系为基础，利用GUS染色组织分析法，研究了影响根癌农杆菌(A.tumefaciens)LBA4404菌株介导的香石竹遗传转化的若干因素，建立了香石竹快速有效的遗传转化体系。香石竹的分化培养基、附加乙酰丁香酮与否、预培养的时间、菌液浓度及浸染时间、共培养时间和卡那霉素浓度等对转化频率的影响。抗性植株经GUS检测表明（本文此处忽略..），外源基因基本已整合进香石竹基因组中。香石竹再生体系的建立。确定以香石竹无菌苗叶片为外植体，从不同细胞分裂素及其他激素配合使用等方面进行选择筛选，建立香石竹叶片离体再生体系。结果表明，不同的细胞分裂素影响叶片不定芽分化频率，其中较低浓度的NAA(0.1mg/L)和TDZ(1.0mg/L)配合使用能有效诱导香石竹叶片不定芽分化。因此，香石竹叶片不定芽分化的适宜培养基为：MS+（文章此处忽略..）1.0mg/LTDZ+0.1mg/LNAA；壮苗培养基为：MS+0.5mg/LBA+0.05mg/LNAA。香石竹遗传转化体系的建立。用根癌农杆菌(A.tumefaciens)LBA4404菌株，介导香石竹的遗传转化，进行比较试验得出：预培养基为MS+1.0mg/LTDZ+0.1mg/LNAA，预培养2d；共培养基为MS+0.1mg/LNAA+1.0mg/LTDZ+100μmol/LAS，暗培养3d；选择分化培养（此处忽略..）基MS+0.1mg/LNAA+1.0mg/LTDZ+60mg/LKm+400mg/LCef中筛选培养；再生的抗性苗的生根筛选培养基为1/2MS+0.1mg/LNAA+25mg/LKm。转基因植株的筛选。再生苗在生根筛选培养基上培养，能获得10.7％的生根率。

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