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农杆菌介导的拟南芥rd29A基因转化苜蓿的研究及柳树组织培养再生

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毕业论文范文题目:农杆菌介导的拟南芥rd29A基因转化苜蓿的研究及柳树组织培养再生,论文范文关键词:农杆菌介导的拟南芥rd29A基因转化苜蓿的研究及柳树组织培养再生
农杆菌介导的拟南芥rd29A基因转化苜蓿的研究及柳树组织培养再生毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:我国盐渍化泥土分布广泛,大量土地荒凉,盐碱地资源的开发利用是我国增加农业可利用土地资源的须要,也是改良生态环境、增加绿色植被、进步森林覆盖率的须要。古代生物技巧的发展为培养耐盐的作物品种提供了新方法跟道路,已经成为改进盐碱地经济而有效的手段。紫花苜蓿(MedicagosativaL.)是世界上种植面积最大,利用最广泛的多年生豆科作物,不仅作为很好饲料而且当初人们将它作为厚味的菜肴利用。柳树(SalixviminalisL.)是精良的园林绿化跟生态树种,同(本文此处忽略..)时在很多方面有重要的用处。目前,人们在农作物跟林草惯例育种方面做了大量工作,获得了很多成果,但周期长,工作量大,因此基因工程的发展跟利用为苜蓿跟林木抗盐育种开辟了一条新的道路。本研究以中苜一号为材料,进行农杆菌介导rd29A基因转化体系的优化研究,获得了转基因新株系;以柳树Q106无菌苗为材料,通过对各种影响因素的筛选,初步树破了组培再生体系,为柳树基因转化奠定基本。目前获得的重要研究成果如下:1、优化了苜蓿转基因体系,获得了转rd29A基因植株农杆菌用含有50mg(本文此处忽略..)/LKan的YEB培养基培养过夜,离心后用MC液体培养基重悬,同时在MC液体培养基中参加AS10mg/L,调剂菌液OD600值为0.3~0.5,作为受体侵染菌液;取继代培养15天的叶片,在菌液中敏捷制造伤口(切去叶柄,而后在叶面上横切两刀),将致伤的叶片在菌液中动摇培养,侵染30分钟,无菌滤纸吸干叶片上多余菌液,转到pH值为6.0、并加有10mg/LAS的共培培养基MC上;共培养3天至叶片四周有淡而透亮的菌斑呈现,用无菌水洗去叶片上的农杆菌,接到MC抉择培养基长进行筛选(MC培养基参加P(文章此处忽略..)PT2mg/L+Cef400mg/L),抉择50~60天后撤掉PPT,同时降落Cef浓度至200mg/L,将抗性胚性愈伤组织转到MSO培养基长进行分化引诱,一个月后获得抗性植株。继代3~4代后,经过PCR检测,初步证明有8株PPT抗性再生植株为转rd29A基因植株。2、柳树Q106组织培养再生体系初探以柳树Q106茎段作为外植体,MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L为基本培养基,暗培养20天,而后转到光下培养,引诱愈伤组织后果好。以带腋芽茎段为外植体,在MS+KT3.0mg/L+NAA(略..)0.2mg/L+蔗糖20g/L培养基上,丛生芽分化后果好。采取MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L培养基培养结实苗较好,最佳生根培养基为MS+6-BA0.01mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L。选取结实苗移栽,经驯化炼苗15-20天后,大田成活率可达98%。


以上为本篇毕业论文范文农杆菌介导的拟南芥rd29A基因转化苜蓿的研究及柳树组织培养再生的介绍部分。
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