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浸透胁迫信号传导关键基因对黑穗醋栗遗传转化的研究

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毕业论文范文题目:浸透胁迫信号传导关键基因对黑穗醋栗遗传转化的研究,论文范文关键词:浸透胁迫信号传导关键基因对黑穗醋栗遗传转化的研究
浸透胁迫信号传导关键基因对黑穗醋栗遗传转化的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:干旱、高盐及低温等环境前提,都会构成对动物的浸透胁迫,使动物缺水受侵害,甚至导致动物逝世亡,是造成作物减产的重要起因。出产上重要采取抗逆性强的品种。黑穗醋栗(RibesnigrumL.)属于多年生木本果树,世代周期长,杂合性高,很多重要经济性状属于多基因把持的数量性状,遗传机理不明,利用惯例方法进行品种选育艰苦重重。利用基因工程手段将外源基因导入作物中,培养出新的品种已成为古代农业跟农作物育种的发展方向。然而黑穗醋栗属于木本(此处忽略..)果树,离体培养技巧还不完美,再生有艰苦,常常无奈获得再生植株,并且缺乏高效的遗传转化方法。针对以上问题,本研究以黑穗醋栗为试材进行组织培养跟遗传转化的初步研究,本研究构建了osCDPK7基因跟osMAPK4基因的动物表白载体;树破了黑穗醋栗茎尖再生体系;利用基因枪法跟农杆菌介导法将osCDPK7基因跟osMAPK4基因转化黑穗醋栗,以期获得转基因植株,来加强作物抗逆性。本研究重要研究成果如下:1.载体构建构建了2个动物表白载体PBC(此处忽略..)7E12跟PBME12。载体PBC7E12上带有组成型启动子E12调控的osCDPK7基因,动物筛选标记为nptⅡ基因。载体PBME12上带有组成型启动子E12调控的osMAPK4基因,动物筛选标记为nptⅡ基因。2.黑穗醋栗再生体系的树破(1)黑穗醋栗愈伤组织的引诱利用黑穗醋栗叶片、叶柄跟茎段引诱愈伤组织,研究了不同PGR配比对黑穗醋栗愈伤组织引诱的影响,为下一步通过愈伤组织引诱不定芽奠定了基本。(2)黑穗醋栗茎尖培养培养基确切定VWP=9摘要断定了黑穗醋栗(文章此处忽略..)茎尖最佳分化跟继代培养基为MS+1mg/LBA,30g/L蔗糖,0.8%琼脂,pH5.8。最佳从生芽生根培养基为1/2MS,30g/L蔗糖,0.8%琼脂,pH5.8。3.基因枪法对黑穗醋栗茎尖的遗传转化断定茎尖分化阶段卡那霉素的筛选压力为25mg/L。丛生芽生根阶段卡那霉素筛选压力为20mg/L。利用基因枪法转化黑穗醋栗茎尖获得抗性芽,抗性芽率为8.4%。4.农杆菌介导法对黑穗醋栗茎尖的遗传转化利用农杆菌介导法转化黑穗醋栗茎尖获得抗性芽,抗性芽率为10.5%。5.转基因植株的分(本文此处忽略..)子检测基因枪法转化获得的抗性植株,经PCR检测,获得osCDPK7基因阳性的植株1株,获得osMAPK4,基因阳性的植株1株。PCR阳性率为9.1%。目前,利用农杆菌介导法转化黑穗醋栗茎尖已获得大量抗性苗,正在持续对转化植株进行筛选培养。下一步将对利用农杆菌介导法转化黑穗醋栗茎尖获得的抗性芽进行检测。


以上为本篇毕业论文范文浸透胁迫信号传导关键基因对黑穗醋栗遗传转化的研究的介绍部分。
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