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利用农杆菌介导法将pta和sb401基因导入甘蓝型油菜的研究

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毕业论文范文题目:利用农杆菌介导法将pta和sb401基因导入甘蓝型油菜的研究,论文范文关键词:利用农杆菌介导法将pta和sb401基因导入甘蓝型油菜的研究
利用农杆菌介导法将pta和sb401基因导入甘蓝型油菜的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:油菜是一种适应性强、用途广、经济价值高、发展潜力大的油料作物,我国60%以上的人口食用菜油,我国油菜面积和总产居世界首位,然而其单产和品质却远远低于加拿大及其他欧洲国家。在油菜生产中,病虫害的发生是油菜高产稳产的限制因子之一。另外,在我国由于常规油菜芥酸和硫代葡萄糖甙含量较高,严重影响了菜籽油的品质和菜籽饼粕的开发应用。因此,推广和普及双低油菜品种、改良品种的抗病虫性并提高菜籽蛋白营养品质,对我国油菜产业的发展将具有重要的意义。基因工程技术的发展,打破了传统育种的局限,可以同时将含目标性状的一个(文章此处忽略..)或多个基因导入受体作物基因组,达到对农作物一个或多个性状的改良。从而为作物育种和改良开拓了一条崭新的途径。由于农杆菌介导的植物转基因方法具有操作简单、转化效率高、较少的拷贝数及整合机制相对简单等优点,而被植物转基因工作者广泛推崇。但农杆菌转化法是一个细菌和愈伤组织共同作用的复杂过程。凡是涉及到细菌活性或愈伤组织状态的因素都可能影响其转化效果。迄今为止,油菜农杆菌转化系统仍存在不少问题,国内外的油菜转基因报道中多以某一特定品种为转化受体,其结果不具有普遍性。本研究利用农杆菌介导法将构建于同一(本文此处忽略..)表达载体的抗油菜蚜虫等同翅目害虫的半夏凝集素pta基因和富含赖氨酸的马铃薯花粉特异水溶性蛋白基因sb401转入甘蓝型双低油菜中,主要成果如下:1.选择四川目前推广的中双6号等8个甘蓝型双低常规油菜品种作为农杆菌转化受体材料,设置了8种激素配比组合,通过选择基本培养基、无菌苗的苗龄、下胚轴切段长度等因素探讨其对植株再生的影响,确定了以MS+6-BA1mg/L+2.4-D0.5mg/L培养基作为下胚轴分化的预培养基,以MS+1~4mg/L6-BA+0.05~0.4mg/LNAA为分化培养基,初步建立了不同油菜品种下胚轴的高效再生体系。(此处忽略..)应用该再生系统,中双6号等四个品种的分化率可达40.67~69.67%。2.在建立高效再生系统的基础上,进一步建立了油菜下胚轴的遗传转化系统。结果表明,取5~6d无菌苗下胚轴,切成0.5cm小段,在附加1.0mg/L6-BA和0.5mg/L2.4-D的MS培养基上对下胚轴进行2d的预培养;在OD_(600)=0.3时离心收集农杆菌菌体并用MS液等体积重悬后,将下胚轴放入悬浮液中浸染30~60S,取出吸去多余菌液后于共培养基(附加100μm/L乙酰丁香酮的预培养基)上进行30~42h的与农杆菌共培养;用cb200mg/L+cef400mg/L洗菌,洗菌后的下胚轴进行一定的干燥处理,并在6—(略..)BA1~4mg/L和NAA0.05~0.4mg/L配比组合的分化培养基上进行6~7d的脱菌培养;再进行筛选分化培养;对抗性芽根据不同品种选择适合的生根培养基进行生根培养。实验证明该再生转化系统选材方便,转化相对简单,各单因素的作用效果明显。3.应用上述遗传转化体系,将构建在同一载体(pDB13PS)T-DNA上的pta和sb401基因


以上为本篇毕业论文范文利用农杆菌介导法将pta和sb401基因导入甘蓝型油菜的研究的介绍部分。
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