水稻WAX2同源基因的克隆及遗传转化的研究

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水稻WAX2同源基因的克隆及遗传转化的研究

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毕业论文范文题目：水稻WAX2同源基因的克隆及遗传转化的研究，论文范文关键词：水稻WAX2同源基因的克隆及遗传转化的研究
水稻WAX2同源基因的克隆及遗传转化的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：干旱是造成农作物大量减产的主要原因之一，角质层是覆盖在植物地上部分最表层的保护层，由上表皮蜡质层和角质层膜组成，具有降低植物表面的水分散失、防止紫外线辐射伤害和抵抗病虫害侵入等其它环境胁迫等功能。拟南芥WAX2基因是首次发现的同时影响上表皮蜡质层和角质膜层代谢并显著影响叶片水分蒸发的基因。其T-DNA插入缺失突变体的叶面水分蒸发显著高于野生型，表明WAX2基因与植物抗蒸腾能力有关。对水稻WAX2同源基因的功能及表达（此处忽略..）调控的研究以及WAX2同源基因过表达有助于阐明WAX2蛋白在植物抗蒸腾和抵抗病菌侵入方面的作用和应用前景。利用拟南芥的WAX2基因和WAX2蛋白，BLAST检索出三个水稻同源基因，分别命名为OsWAX2-1、OsWAX2-2,OsWAX2-3，与拟南芥WAX2基因的同源性分别为56.0％、55.2％、52.0％；其预测的编码蛋白与WAX2蛋白的同源性分别为61.5％、60.5％、64.7％。这三个蛋白都存在四个跨膜结构和两个固醇去饱和酶的保守区，说明这三个蛋白质都属于（本文此处忽略..）跨膜蛋白并可能与角质层的蜡质合成有关。从全长cDNA数据库检索获得了三个水稻WAX2同源基因的全长cDNA，从含目的基因cDNA的质粒中扩增出三个水稻WAX2同源基因，在引物5’端添加了BamHⅠ或XbaⅠ两个酶切位点，PCR产物经此两个限制性内切酶酶切，并将其插入到用同样限制性内切酶酶切的pCAMBIA-1300M载体上，构建了三个水稻WAX2同源基因的过表达载体pOEOSW2-1、pOEOSW2-2、pOEOSW2-3，利用CaMV（文章此处忽略..）35S启动子驱动水稻WAX2同源基因过表达。同样从含目的基因cDNA的质粒中扩增出RNAi的顺式和反式片断，从质粒pBI121中扩增出部分GUS片断用作RNAi的顺反片断之间的中间序列，然后依次连接到中间载体pBSK上，最后将整个RNAi片断双酶切下来插入到表达载体pCAMBIA-1300M中，构建了三个水稻WAX2同源基因的RNAi表达载体pCROSW2-1、pCROSW2-2、pCROSW2-3，同样也是以CaMV35S启动子驱动其表达，希望（此处忽略..）用RNAi技术抑制目的基因的表达。通过冻融法将水稻WAX2同源基因的6个表达载体转化到根癌农杆菌EHA105、LBA4404和GV3101中。采用农杆菌介导法进行了水稻日本晴品种的遗传转化，经过农杆菌转染、选择、预分化、分化和生根培养，最后得到了具有Hyg抗性的水稻转基因苗。

以上为本篇毕业论文范文水稻WAX2同源基因的克隆及遗传转化的研究的介绍部分。

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