荧光假单胞菌的分离及蝎毒基因的原核表达

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荧光假单胞菌的分离及蝎毒基因的原核表达

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毕业论文范文题目：荧光假单胞菌的分离及蝎毒基因的原核表达，论文范文关键词：荧光假单胞菌的分离及蝎毒基因的原核表达
荧光假单胞菌的分离及蝎毒基因的原核表达毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)是植物内生菌和植物根际微生物,它有促进植物根际生长、生物防治双重功能。北非蝎昆虫毒素AaHIT1(AndroctonusaustralisHectorinsecttoxin,AaHIT)是神经毒素,能专一作用于昆虫而对哺乳动物无害或毒性很小,在开发新型生物杀（本文此处忽略..）虫剂的领域里有着诱人的前景。从上海周边的宝山、奉贤、浦东等地区采集植物根际土壤,用KB培养基分离出产荧光的菌株,经过形态观察和生化鉴定,筛选出其中的荧光假单胞菌,利用这些荧光假单胞菌与农作物病原微生物通过菌斑抑制法,从中分离到有抑制病原菌作用的菌株。大量实验和文献证明,荧光假单胞菌是良好的基因工程菌的受体菌（文章此处忽略..）,所以,本实验将蝎昆虫毒素AaHIT1基因转入分离得到的荧光假单胞菌中,使AaHIT1基因能在原核系统中表达。首先,根据AaHIT1的氨基酸序列以及原核微生物对密码子的偏好,设计DNA的编码序列。由于设计出的AaHIT1基因将要在大肠杆菌中试表达,所以,设计DNA序列时,要考虑大肠杆菌对密码子的偏好。其次,依据Aa（此处忽略..）HIT1的DNA序列设计互补的8条引物,在退火、延伸的温度下,8条引物相互拼接,经测序鉴定形成了与预先设计的AaHIT1基因序列一致的DNA序列。将AaHIT1的编码序列与pET32a载体连接,构建pET32a/AaHIT1重组质粒,在E.coliBl21中进行试表达。表达成功后,将AaHIT1的编码序列克隆到多宿主表达载体pSUP（此处忽略..）106中,形成pSUP106/AaHIT1重组载体,将其导入到有抑菌作用的荧光假单胞菌中,表达产物经SDS-聚丙烯酰胺电泳检测,结果证明北非蝎昆虫毒素AaHIT1已在荧光假单胞菌中表达。进一步表明,为研制“双价”环境友好型基因工程荧光假单胞菌奠定了基础。

以上为本篇毕业论文范文荧光假单胞菌的分离及蝎毒基因的原核表达的介绍部分。

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