OsCH2和OsHSP82基因过表达载体构建和水稻遗传转化

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OsCH2和OsHSP82基因过表达载体构建和水稻遗传转化

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毕业论文范文题目：OsCH2和OsHSP82基因过表达载体构建和水稻遗传转化，论文范文关键词：OsCH2和OsHSP82基因过表达载体构建和水稻遗传转化
OsCH2和OsHSP82基因过表达载体构建和水稻遗传转化毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：我国的主要农作物水稻每年因高温热害而造成巨大的减产。水稻耐热相关基因的功能鉴定和调控研究对阐明耐热机制，通过基因工程手段改进水稻作物的耐热性具有十分重要的意义。叶黄素可破坏高温产生的“活性氧”提高植物的耐热性，高温热激下产生的热激蛋白也可提高植物的耐热力。因此通过构建水稻β—胡萝卜素羟化酶基因OsCH2和热激蛋白基因OsHSP82过表达载体，进而对转基因水稻耐热性进行鉴定，可望确定其功能及获得水稻耐热新材料（本文此处忽略..）。以拟南芥β-胡萝卜羟化酶和热激蛋白基因的序列，从TigrRiceGenomeAnnotation检索到与抗旱耐热功能相关的水稻β—胡萝卜素羟化酶基因3个和热激蛋白基因53个，从中各选取一个基因作本研究用。这两个基因的LocusName分别为LOC_Os04g48880和LOC_Os09g30418。从全长cDNA数据库获得了对应的全长cDNA，登录号分别为AK060559和AK061896，各命名为OsCH2和OsHSP82。水稻OsCH2蛋白与玉米、龙胆草、阿拉（略..）比卡咖啡豆、番茄、甜橙、番红花蛋白同源性分别为85％、57％、57％、60％、58％和61％，OsHSP82蛋白与小麦、大麦、烟草、番茄和拟南芥蛋白同源性分别为95％、94％、90％、90％和89％。水稻OsCH2蛋白存在2个跨膜螺旋结构域，在C端存在一个β-胡萝卜素羟化酶功能域，还存在一个与脂质体代谢有关的固醇去饱和酶保守区。水稻OsHSP82蛋白无跨膜结构域，在N末端存在一个组氨酸蛋白激酶功能域，还存在一个HSP90结构域。从RiceGenomeResou（略..）rceCenter索取到含全长cDNA的质粒AK060559和AK061896，并根据水稻OsCH2和水稻OsHSP82全长cDNA基因序列设计引物，扩增水稻OsCH2和水稻OsHSP82全长cDNA片段并将其克隆到植物表达载体pCAMBIA-1300—multi中，置于CaMV35S启动子下游，使其目的基因能够过分表达。对重组子进行PCR和酶切鉴定，获得正确的水稻β—胡萝卜素羟化酶基因OsCH2和热激蛋白基因OsHSP82的两个过表达载体。采用冻溶法将（文章此处忽略..）构建的过表达载体pOEOsHSP82和pOEOsCH2转化根癌农杆菌EHA105菌株，通过农杆菌介导法将OsHSP82和OsCH2基因导入到水稻中，分别获得了3株OsHSP82和5株OSCH2基因的抗性转基因水稻苗。

以上为本篇毕业论文范文OsCH2和OsHSP82基因过表达载体构建和水稻遗传转化的介绍部分。

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