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小菜蛾Bt抗性的AFLP标记研究

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毕业论文范文题目:小菜蛾Bt抗性的AFLP标记研究,论文范文关键词:小菜蛾Bt抗性的AFLP标记研究
小菜蛾Bt抗性的AFLP标记研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis,Bt)是目前世界上用途最广、产量最大的微生物杀虫剂,在世界范围内得到广泛的应用。但目前转Bt基因农作物和Bt制剂的使用正面临着害虫对Bt抗药性的威胁。小菜蛾Plutellaxylostella(L.)是十字花科蔬菜的重要害虫,也是最早发现的对Bt产生抗药性的田间种群,其抗药性仍在增长。本研究采用分子生物学技术(本文此处忽略..),分别以美国敏感、美国抗性(以CrylAc毒蛋白进行选育)、国内田间采集(室内分别以CrylAc毒蛋白汰选及Bt制剂汰选)小菜蛾种群为材料,建立了有效的AFLP分子标记体系,筛选出Bt抗性小菜蛾种群中的特异性基因片段;运用基因克隆技术,对小菜蛾抗Bt毒素特异性基因片段进行了克隆和序列分析。主要结论如下:1.比较了小菜蛾饲养笼与小菜蛾饲养箱对饲养小菜蛾的差异,结果表明,用(本文此处忽略..)小菜蛾饲养笼饲养的小菜蛾种群产卵量高,发育更整齐。2.用CrylAc毒蛋白及Bt制剂分别对小菜蛾进行了室内抗性选育,获得对CrylAc毒蛋白抗性倍数为14.8和24.43的两个小菜蛾抗性种群-美国抗性种群和深圳抗性种群,以及对Bt制剂抗性倍数为74.47的小菜蛾上海抗性种群。3.利用AFLP技术对小菜蛾抗性与敏感种群对Bt毒素抗药性在基因上的差异进行研究。64对AFLP引物组合共扩增出2024条清(文章此处忽略..)晰的条带,平均每对引物可获得32条扩增条带。其中,11对引物能够在对Bt毒素抗性与敏感的小菜蛾种群间扩增出特异表达条带,特异表达检出率为8.79%。11对引物共扩增出32条特异表达条带。4.AFLP分子标记与PCR技术相结合,从银染后的PAGE胶上将特异性目的片段挖带回收,与pEASY-T载体连接,从三个抗性小菜蛾种群中共克隆出14条可能与Bt抗性相关的特异性基因片段。5.对其中的一条特异性(文章此处忽略..)基因片段设计特异性引物,经PCR扩增检测验证,可在所有的抗性种群中扩增出一条106bp的条带,而敏感种群没有,证明该片段小菜蛾对Bt产生抗药性相关,可用于小菜蛾对Bt抗性的早期检测。其它特异性基因片段是否与小菜蛾对Bt毒素产生抗药性相关,这些都有待于进一步的试验验证。


以上为本篇毕业论文范文小菜蛾Bt抗性的AFLP标记研究的介绍部分。
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