根癌农杆菌介导双价抗虫基因转化芥菜型油菜的研究

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根癌农杆菌介导双价抗虫基因转化芥菜型油菜的研究

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根癌农杆菌介导双价抗虫基因转化芥菜型油菜的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：油菜属于十字花科芸薹属植物，在生长期间常受到鳞翅目等虫害的危害，造成严重的减产。目前主要采取的是化学防治，但是化学农药的残留会对环境产生很大的污染。利用基因工程技术把外源抗性基因转至农作物中并使其表达，而使植物具有抗（此处忽略..）虫性，这种方法已经越来越受到重视。本论文以芥菜型油菜33B、918B的子叶柄作为外植体，用农杆菌介导的转化法将东亚钳蝎昆虫特异性毒素基因与具有广谱杀虫作用几丁质酶基因转入油菜中。通过对油菜组培分化率的统计分析，研究了影响根癌农（此处忽略..）杆菌转化油菜的有关因素。试验结果表明：表面消毒剂选用0.1％的HgCl2的消毒效果比较好，并且生长的无菌曲壮实；苗龄为5d的子叶柄的分化率最高，更适合作农杆菌的转化材料；农杆菌感染子叶柄的时间10min，这样不仅分化率高，而且也（本文此处忽略..）不会有褐化现象；从抗生素对农杆菌的抑制和对油菜子叶柄分化的影响两方面考虑，确定了羧苄青霉素的适宜浓度为500mg/L、卡那霉素的筛选浓度为10mg/L。从而建立了较为完善的转化体系。用农杆菌[EHA105(pB1101)]将双价抗虫基因转化油菜（此处忽略..）共36批，获得了抗卡那霉素的再生苗153株，再生率为2％左右，移栽成活21株。对成活植株进行了PCR分子检测，证实有外源基因的整合，并且转基因植株形态正常。

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