丹皮酚体内外诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其机制研究

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丹皮酚体内外诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其机制研究

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毕业论文范文题目：丹皮酚体内外诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其机制研究，论文范文关键词：丹皮酚体内外诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其机制研究
丹皮酚体内外诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其机制研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：食管癌(esophagealcancer,EC)是最常见的恶性肿瘤之一,世界范围内因癌症死亡的病例中,食管癌居第6位。世界上食管癌每年新发病例约为30万人,其中大约一半在中国。食管癌有腺癌(adenocarcinoma,AC)和鳞癌(squamouscellcarcinoma,SCC)两种病理类型,中国以鳞癌多见。虽然EC的手术方法和治疗有显著的进步,但EC的预后很差。因此,探求新的有价值治疗手段和策略显得十分必要。从中药和其他天然产物中寻求高效、低毒的新型抗食管癌物质并深入探讨其抗肿瘤作用机制是当前国内外研究的重要课题。越来越多的研究表明,肿瘤与炎症密切相关。在那些炎症相关的肿瘤中,COX-2表达普遍上调。慢性炎症是导致食管癌发生的一个重要原因,COX-2可能在其中发挥了很重要的作用。选择性COX-2抑制剂预防肿瘤的作用已经引起学者们的关注,针对COX-2的抗食管癌治疗是目前研究的热点。Survivin是一种独特的凋亡抑制基因,属于凋亡蛋白抑制因子(inhbitorapop（此处忽略..）tosisproteins,IAPs)家族。在食管癌、结直肠癌、膀胱癌、非小细胞肺癌和乳腺癌中呈过表达。近期研究发现,Survivin的表达与食管癌对放化疗的敏感性和预后有密切的联系。丹皮酚(Paeonol,Pae)又称牡丹酚,是毛莨科植物牡丹PaeoniaSuffruicosaAndr.根皮和萝摩科植物徐长卿PycnostelmaPaniculatum(Bunge)K.Schum干燥根或全草的主要有效成分。现代药理研究表明,Pae具有镇静催眠、解热镇痛、抗菌消炎、免疫调节、抗氧化及保护心脑血管等广泛的药理活性。我们在前期发现,Pae在体内外具有明显的抗肿瘤作用,本研究通过观察Pae在体内外对人Eca-109食管癌细胞COX-2、Survivin表达的影响,进一步探讨其作用机制。1Pae体内外对Eca-109细胞增殖的影响1.1Pae体外对Eca-109细胞增殖的影响选用人食管鳞癌细胞株Eca-109,采用MTT法检测了Pae体外抑制人食管癌细胞株增殖的量效和时效关系。结果显示:(1)Pae(7.81～（略..）250mg·L~(-1))对细胞有增殖抑制作用,药物浓度越高,抑制作用越强,呈现明显的剂量效应关系。以浓度的对数与抑制率进行直线相关分析:r=0.908,P＜0.05。IC_(50)值为98.68mg·L~(-1)。(2)系列浓度Pae作用于细胞24h、48h及72h后观察细胞的生长情况,结果显示Pae作用时间越长,对上述细胞的抑制作用越强,呈时间依赖性。1.2Pae体内对Eca-109细胞增殖的影响Pae50,100和200mg·kg~(-1)组和CDDP5mg·kg~(-1)组均能明显抑制裸鼠皮下肿瘤的生长,抑瘤率分别为23.54%,27.91%,34.46%和58.71%,一定剂量的Pae具有抑制人Eca-109食管癌裸鼠移植瘤生长的作用,且抑瘤率随着药物剂量的增加逐渐升高。以浓度的对数与抑制率进行直线相关分析,r=0.974,P＜0.05。2Pae体内外诱导Eca-109细胞凋亡2.1Pae体外诱导Eca-109细胞凋亡选用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法,检测细胞凋亡。采用凋亡指数分析凋亡细胞百分比,Pae作用24h后,可检测到形态发生改变的早期凋亡细胞。24h、48h和72h时其凋亡发生率分别为(5.2±0.9)%、(14.7±1.8)%和(18.3±2.（本文此处忽略..）4)%与对照组(1.8±1.5)%比较,差异具有显著性(P＜0.01)。应用流式细胞仪(FlowCytometry,FCM)检测细胞凋亡率。Pae可诱导Eca-109食管癌细胞发生凋亡,在DNA直方图上G_0/G_1期前可见亚G_1峰即凋亡峰,24h、48h和72h时其凋亡发生率分别为4.3%、13.1%及17.6%。其诱导凋亡作用呈现明显时间依赖关系。2.2Pae体内诱导Eca-109细胞凋亡TUNEL染色可发现棕褐色的凋亡细胞呈散在或片状分布,Pae各剂量组的调亡指数(apoptosisindex,AI)分别为(11.02±2.58)%、(19.80±2.77)%、(24.48±4.35)%和(27.13±4.39)%,与模型组(4.81±0.83)%比较,差异均有显著性意义(P＜0.05orP＜0.01)。3Pae作用后Eca-109细胞周期变化应用Mcycle软件分析Pae作用后细胞周期的变化。结果发现,Pae作用后可引起细胞周期的变化。Pae可引起人Eca-109食管癌细胞S期细胞大量堆积,G_0/G_1期细胞比例明显下降,细胞被阻滞在S期。4Pae体内外对Eca-109细胞COX-2和Survivin表达影响采用免疫组化S-P法分别检测人Eca-109食管癌细胞和裸鼠抑制瘤（本文此处忽略..）COX-2和Survivin的表达。运用生物图像分析系统软件分析,结果发现,Pae体内外均能下调COX-2和Survivin的表达5结论Pae在体外能抑制人食管癌Eca-109细胞增殖、体内有抗裸鼠移植瘤作用,其机制可能与下调COX-2和Survivin的表达进而诱导凋亡有关。

以上为本篇毕业论文范文丹皮酚体内外诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其机制研究的介绍部分。

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