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玉米肽的制备条件及其醒酒护肝机理研究

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毕业论文范文题目:玉米肽的制备条件及其醒酒护肝机理研究,论文范文关键词:玉米肽的制备条件及其醒酒护肝机理研究
玉米肽的制备条件及其醒酒护肝机理研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:为了利用植物蛋白资源,使湿法生产淀粉的副产物——玉米黄粉增值,本文采用正交试验研究了从黄粉中提取玉米蛋白及用中性蛋白酶(Nutrase)、碱性蛋白酶(Alcalase)酶解玉米蛋白,制备玉米醒酒肽的条件;进一步采用超滤、配位色谱法、RP-HPLC、氨基酸分析仪等手段对玉米肽进行了分离及成分分析。通过体外抗羟基自由基试验、激活乙醇脱氢酶(ADH)活性试验及动物试验考察醒酒肽对小鼠血清中乙醇浓度的影响,结合玉米肽对D-氨基半乳糖(D-Gal)及乙醇诱导急性肝损伤模型鼠的保护作用研究,初步探讨了玉米肽的醒酒保肝作用机制;比较了玉米肽和玉米蛋白的功能性质,对玉米肽进行了脱苦研究,并用体外激活ADH活性试验比较了几种脱苦方法对玉米肽醒酒活性的影响。结果如下:1.提取正交试验表明:以粗蛋白含量为56.97%玉米黄粉为原料,优化提取玉米蛋白条件,其最佳条件为:提取液(由0.1mol/LNaOH与95%乙醇配制)碱醇比为45/55(v/v),料液比1:15,提取时间2h,温度55℃;在最佳提取条件下,提取物中粗蛋白含量提高到93.14%。2.玉米肽醒酒作用机理研究(1)酶解正交试验表明:用中性蛋白酶酶解玉米蛋白,当料液比(此处忽略..)为1:25,酶底比为1.5%,酶解时间为2h时,酶解所得玉米肽对ADH的激活率最高为35.75%,对·OH的抑制率为61.54%,肽回收率为20.31%;用碱性蛋白酶酶解玉米蛋白,当料液比为1:25,酶底比为0.5%,酶解时间为4h时,酶解所得玉米肽对ADH的激活率为最高为27.26%,对·OH的抑制率为59.58%,肽回收率可达82.06%。前者虽有较高的ADH激活率,但其肽回收率过低。(2)动物试验表明:灌胃中性蛋白酶低水解度肽(2h、酶底比0.5%、料液比1:25)能使小鼠血醇浓度降低54.06%(极显著降低,p<0.001),但该肽的回收率过低(19.97%);灌胃碱性蛋白酶中水解度肽(4h、酶底比0.5%、料液比1:20)的醒酒活性高,并存在剂量效应关系,当灌胃剂量为800mg/kg·bw时,小鼠血醇浓度降低了62.80%(极显著降低,p<0.001),且该粗肽的回收率高(82.01%);碱性蛋白酶的中水解度肽具有开发价值。(3)动物试验与体外试验结果基本吻合,即中性蛋白酶低水解度肽和碱性蛋白酶中水解度肽醒酒效果好,说明并非水解度越高,醒酒活性越好;同时也说明用体外激活ADH活性试验和抑制·OH试验,筛选高醒酒活性玉米肽是便捷可行的方法。(4)以对ADH的激活率和对·OH抑制率为活性跟踪指标,将碱性蛋白酶酶(略..)解玉米粗肽(crudecornpeptides,CCP)过分子量为6000u的超滤膜,得到高活性玉米肽(cornpeptides,CP),CP对·OH抑制率高于CCP,前者为76.96%,后者为50.50%;而CCP对ADH的激活率高于CP,前者为30.69%,后者为26.18%;采用Cu~(2+)-SephadexG-25配位色谱法分离CP,得CPⅠ、CPⅡ和CAA。三者中以CPⅡ对·OH抑制率及对ADH的激活率最高,分别为61.91%和28.85%。(5)氨基酸分析结果显示:玉米肽中丙氨酸、亮氨酸含量高,尤其是亮氨酸含量;CP、CPⅠ、CPⅡ具有高F值。(6)本文实验结果提示:玉米肽的醒酒作用机制之一是通过激活胃ADH,加强乙醇在胃肠道的首过代谢,有胃肠吸收抑制剂的作用;其醒酒作用机制之二是通过激活肝脏ADH,增强乙醇的代谢,即有代谢增强剂的作用;其醒酒作用机制之三是可通过提高丙氨酸、亮氨酸的浓度,产生稳定的辅酶(NAD~+),抑制血液中乙醇浓度的升高。3.碱性蛋白酶酶解CCP对小鼠化学性肝损伤的保护作用(1)CCP对D-Gal引起的小鼠急性肝损伤有保护作用,且呈剂量——效应关系。与D-Gal肝损伤模型组小鼠比较,当CC(本文此处忽略..)P灌胃剂量为800mg/kg·bw时,能极显著(p<0.01)降低小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性和甘油三酯(TG)含量,同时也能极显著(p<0.01)地抑制还原型谷胱甘肽(GSH)含量的下降;病理学观察也显示出明显的剂量——效应关系,高剂量给肽组小鼠肝细胞病变明显好转或恢复。(2)CCP对乙醇引起的小鼠急性肝损伤有保护作用,生化指标呈剂量——效应关系。与小鼠乙醇肝损伤模型组比较,灌胃CCP200mg/kg·bw、400mg/kg·bw、800mg/kg·bw时,均能极显著地抑制小鼠血清中GSH含量的下降;灌胃CCP800mg/kg·bw时,可极显著降低TG的含量、显著抑制MDA的产生;肝组织病理学观察显示,高剂量给肽组小鼠肝细胞与正常组小鼠肝细胞基本相同;但从组织形态学来说,该模型组鼠肝损伤程度及脂肪变性程度均不及D-Gal模型组明显,这与乙醇的毒性不及D-Gal有关。(3)本文实验结果提示:玉米肽的保肝机制之一是其具有良好的抑制自由基的能力;保肝机制之二是其能激活ADH的酶活,增强乙醇的胃肠首过代谢;从而减轻自由基、高浓度乙醇对肝脏造成的损伤;保肝机制之三是具有高F值,可以纠正(此处忽略..)急性肝损伤模型鼠血浆及脑中的氨基酸病态模式。4.碱性蛋白酶酶解CCP的应用研究(1)和玉米蛋白相比,玉米肽的溶解度大大提高,尤其是在等电点,在不同pH值下溶解度均在90%以上;起泡性和乳化性都得到很大程度的提高;黏度降低,流动性好。(2)分别利用活性炭、风味酶和β-环状糊精三种方法对玉米肽进行脱苦,并考察了脱苦对醒酒活性的影响,三种脱苦方法各有利弊,应用于具体的食品中时要综合考虑。(3)制作了两款风味不同的醒酒保肝活性肽饮料,即玉米原味饮料和嗜好型咖啡味饮料,均适于用作宴席上饮酒前的茶点。


以上为本篇毕业论文范文玉米肽的制备条件及其醒酒护肝机理研究的介绍部分。
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